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TSKgel SW系列色譜柱維修保養(yǎng)

時間:2023-05-12    來源:    作者:儀多多網(wǎng)     

TSKgel SW系列色譜柱主要用于水相高效凝膠過濾色譜(GFC)。該類色譜柱的設計適用于各類水溶性物質,如蛋白質、酶以及核酸等的分析或制備。我們同時提供不銹鋼色譜柱和玻璃色譜柱。特別是玻璃色譜柱,不但是生物相容型的,而且還配有一個擁有塑料末端接頭的高精度玻璃管。

一、故障排除

使用TSKgel色譜柱時,按照以下說明可以避免大部分問題的發(fā)生。但是,有些問題(如由色譜柱壽命、吸附物質、產生的氣泡、填料干燥或溶劑凝固等引發(fā)的問題)一旦發(fā)生就無法清除,因此使用色譜柱時應非常小心。

1、末端接頭堵塞

如果壓降增加或流速降低,應該從色譜柱逆向進液清洗末端接頭。如果無法清除堵塞,則必須替換新的接頭。

2、替換末端接頭

準備一個新的末端接頭,并從色譜柱上取下舊的末端接頭。注意不要碰到填料表面。如果發(fā)現(xiàn)柱頭發(fā)生塌陷,該處空間應按照12.3節(jié)的說明使用TSKtop-off gel填充。然后,請參照4.4節(jié)清除進口側的空氣。

3、柱頭塌陷

壓力上升過快、使用的流速大于設定的限值、脈動式進液、頻繁替換溶劑等都會引發(fā)柱頭塌陷。柱頭塌陷會劇烈降低理論塔板數(shù)(N)(這類色譜柱的塔板數(shù)一般只有普通色譜柱的70%以下),而且比較容易導致拖尾峰。發(fā)生此類現(xiàn)象時,請從色譜柱的進口側取下末端接頭,如果發(fā)現(xiàn)空隙,請用TSKtop-off gel填充。此時,特別是玻璃色譜柱,必須使用扭矩扳手以2.9 N?m的力道擰緊末端接頭。這樣,應該可以恢復到更高的分離度。如果由于某些特殊原因,使用該方法無法恢復分離度,請?zhí)鎿Q為新的色譜柱。

4、色譜柱雜質吸附嚴重

長時間重復使用色譜柱后,洗脫時間有時會發(fā)生劇烈變化。此時,選擇其他溶劑清洗色譜柱比較有效。以下為幾種典型的清洗方法。

① 離子性吸附(清除離子性雜質)

通過提高清洗液的鹽濃度(通常0.5 mol/L)進行過柱清洗。

使用酸性水溶液,如磷酸鹽緩沖液(pH 2.5)過柱清洗。

② 疏水性吸附(清除疏水性雜質)

在清洗液中添加甲醇、乙腈(10-20%)等水溶性有機溶劑進行過柱清洗。本法請注意緩沖液中鹽的析出。

③ 氫鍵吸附(清除難溶的蛋白質或其他物質)

在清洗液中添加6-8 mol/L的尿素或0.2-0.3%的中性表面活性劑(Triton、Tween、Brij等)后進行過柱清洗。但需要注意尿素及表面活性劑的柱中殘留。

注:色譜柱的清洗方法非常重要,而且經常替換溶劑可能會老化色譜柱。因此,應僅在必要的情況下清洗柱子。一般來說,清洗時間可選擇為過柱5-10個柱體積便可。在吸附成分其吸附力極強時,即使進行過清洗,柱性能也有可能得不到恢復。另外,請充分考慮清洗液的pH值,以避免損壞色譜柱。




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