液相色譜儀器的故障,我們是可以從很多方面入手將問(wèn)題解決的:第一種是從組件的運(yùn)行估算,如壓力、流量變化;第二種是從色譜圖的異常情況估計(jì),如峰值時(shí)間、峰形;第三是從數(shù)據(jù)結(jié)果中分析。
一、從壓力變化判斷
1、壓力無(wú)
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
面版燈不亮 | 電源不通 | 檢査電源 |
接頭松脫 | 擰緊接頭 | |
泵頭漏液 | 接口太松 | 擰緊泵頭螺絲 |
泵密封墊磨損 | 更換密封墊 | |
泵不送溶劑 | 泵頭有氣泡 | 排氣泡,溶劑需脫氣 |
使用的溶劑黏性太高 | 換低黏性溶劑 | |
溶劑貯液器中過(guò)濾器臟 | 清洗貯液瓶、過(guò)濾器 | |
排空閥打開 | 關(guān)閉排空閥 | |
控制器設(shè)定不正確 | 設(shè)置正確 | |
流動(dòng)相不夠 | 補(bǔ)足流動(dòng)相 |
2、壓力高
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
壓力值高 | 泵流速設(shè)定太高 | 設(shè)定正確的流速 |
流動(dòng)相使用不恰當(dāng) | 使用恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相 | |
緩沖結(jié)晶鹽沉淀 | 沖洗 | |
樣品與流動(dòng)相不互溶 | 稀釋或改變流動(dòng)相 | |
柱溫太低 | 升高溫度 | |
色譜柱性能下降 | 換柱 | |
溶劑貯液器中過(guò)濾器臟 | 清洗 | |
鏈接管路阻塞 | 沖洗,必要時(shí)更換 | |
進(jìn)樣閥阻塞 | 沖洗進(jìn)樣器 |
3、壓力低
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
壓力值低 | 泵流速設(shè)定太低 | 設(shè)定正確的流速 |
色譜柱選擇不恰當(dāng) | 更換恰當(dāng)?shù)纳V柱 | |
柱溫過(guò)高 | 降低柱溫 | |
系統(tǒng)漏液 | 檢查漏液位置并維修 | |
流動(dòng)相使用不當(dāng) | 改變流動(dòng)相 |
二、從色譜圖的異常情況推測(cè)
1、峰前沿
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
峰前沿 | 柱性能下降 | 更換色譜柱 |
保護(hù)柱失效 | 換柱芯 | |
進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高 | 降低進(jìn)樣體積或降低樣品濃度 |
2、峰拖尾
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
峰拖尾 | 柱性能下降 | 更換色譜柱 |
保護(hù)柱失效 | 換柱芯 | |
色譜柱或保護(hù)柱被污染 | 清洗柱或保護(hù)柱,必要時(shí)更換 | |
色譜柱選擇不當(dāng) | 選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱 | |
流動(dòng)相選擇不當(dāng) | 選擇恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相 |
3、峰變寬
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
峰變寬 | 柱性能下降 | 更換色譜柱 |
保護(hù)柱失效 | 換柱芯 | |
色譜柱或保護(hù)柱被污染 | 清洗柱或保護(hù)柱,必要時(shí)更換 | |
色譜柱選擇不當(dāng) | 選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱 | |
流動(dòng)相選擇不當(dāng) | 選擇恰當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相 | |
流動(dòng)相流速太低 | 調(diào)節(jié)流速 | |
緩沖液濃度太低 | 增加濃度 | |
系統(tǒng)沒到達(dá)平衡 | 使系統(tǒng)到達(dá)平衡 | |
進(jìn)樣器問(wèn)題 | 檢査進(jìn)樣器 | |
環(huán)境溫度變化 | 使用柱溫箱 | |
漏液 | 檢查漏夜的位置并維修 | |
出現(xiàn)兩個(gè)或多個(gè)未被完全分離的物質(zhì)的峰 | 選擇其它色譜條件以改善分離效果 | |
檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大 | 使用較小的時(shí)間常數(shù) |
4、峰分叉
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
峰分叉 | 柱性能下降 | 更換色普柱 |
保護(hù)柱失效 | 換柱芯 | |
色譜柱或保護(hù)柱被污染 | 清洗柱或保護(hù)柱,必要時(shí)更換 | |
進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高 | 降低進(jìn)樣體積或降低樣品濃度 | |
樣品溶劑不溶流動(dòng)相 | 改變?nèi)軇┗虿捎昧鲃?dòng)相溶解樣品 |
5、無(wú)峰
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
無(wú)峰 | 檢測(cè)器參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤 | 設(shè)置正確的檢測(cè)器參數(shù) |
樣品降解 | 檢查樣品配制過(guò)程,更換樣品 | |
自動(dòng)進(jìn)樣器故障 | 檢査進(jìn)樣器 | |
無(wú)樣品 | 加樣品 | |
檢測(cè)器與數(shù)據(jù)處理裝置鏈接故障 | 檢查并正確鏈接 |
6、負(fù)峰
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
出現(xiàn)所有負(fù)峰 | 連接數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)信號(hào)線接反 | 正確連接 |
記錄儀或檢測(cè)器信號(hào)極性相反 | 改變極性設(shè)置 | |
出現(xiàn)一個(gè)或幾個(gè)負(fù)峰 | 離子對(duì)分離體系對(duì)峰的影響 | 在流動(dòng)相中溶解樣品 |
使用的流動(dòng)相吸收高 | 使用流動(dòng)相稀釋樣品 | |
自動(dòng)進(jìn)樣器注射進(jìn)空氣 | 清洗自動(dòng)進(jìn)樣器 |
7、鬼峰
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
鬼峰 | 樣品前處理時(shí)產(chǎn)生降解或混入雜質(zhì) | 用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、檢查樣品處理過(guò)程,換新樣品 |
前一次進(jìn)樣的洗脫物 | 增加分析時(shí)間或梯度洗脫、提高流速、如問(wèn)題仍存在,兩次進(jìn)樣間用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱 | |
注射器臟 | 清洗注射器、沖洗進(jìn)樣口 | |
流動(dòng)相被污染 | 清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過(guò)濾器、使用HPLC級(jí)試劑 | |
柱被污染 | 清洗柱或更換柱 | |
六通閥污染 | 清洗六通閥 | |
檢測(cè)器污染 | 清晣檢測(cè)器 | |
管路污染 | 沖洗 | |
流動(dòng)相中含有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑變化 | 使用無(wú)防腐溶劑 |
8、保留時(shí)間變化
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
保留時(shí)間不重復(fù) | 系統(tǒng)不問(wèn)或未達(dá)到平衡 | 分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡 |
室溫波動(dòng)大 | 使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境 | |
柱被污染 | 沖洗柱或更換柱 | |
溶劑配比不合適 | 調(diào)節(jié)溶劑配比 | |
進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高 | 減小進(jìn)樣體積 |
9、保留時(shí)間不斷變化
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
保留時(shí)間不斷變化 | 流速變化 | 重新設(shè)定流速,檢查泵是否正常工作 |
系統(tǒng)沒有達(dá)到平衡 | 分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡 | |
柱被污染 | 沖洗柱或更換柱 | |
流動(dòng)相被污染 | 清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過(guò)濾器、使用HPLC級(jí)試劑 | |
系統(tǒng)泄漏 | 檢查并進(jìn)行維修 | |
流動(dòng)相脫氣不夠充分 | 清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過(guò)濾器、使用HPLC級(jí)試劑 | |
室溫變化 | 使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境 | |
柱恒溫箱設(shè)置有誤 | 設(shè)置正確的溫度 |
10、基線漂移
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
基線漂移 | 系統(tǒng)不穩(wěn)或沒有達(dá)到平衡 | 分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡 |
室溫不穩(wěn) | 使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境 | |
流動(dòng)相污染或分解 | 清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過(guò)濾器、使用HPLC級(jí)試劑 | |
流動(dòng)相脫氣不充分 | 脫氣重新平衡系統(tǒng) | |
流動(dòng)相配比不當(dāng)或流速變化 | 更改配比或流速 | |
柱被污染 | 沖洗柱或更換柱 | |
固定相流失 | 為說(shuō)明問(wèn)題存在,用一段連接管路代替色譜柱,通流動(dòng)相檢測(cè)基銭 | |
檢測(cè)池被污染或有氣體 | 用甲醇或其他強(qiáng)極性的溶劑沖洗流通池 | |
測(cè)定的波長(zhǎng)選擇有誤 | 使用分光光度計(jì)說(shuō)明背景吸收,如背景值高,說(shuō)明流動(dòng)相含有紫外吸收化合物導(dǎo)致基線漂移。使用的流動(dòng)相應(yīng)在縈外截止波長(zhǎng)以外,或更換溶劑 | |
系統(tǒng)泄漏 | 檢查并進(jìn)行維修 | |
樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì) | 用強(qiáng)度合適的溶劑清洗色譜柱 |
11、無(wú)規(guī)則基線噪音
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
無(wú)規(guī)則基線噪音 | 系統(tǒng)不穩(wěn)或沒有達(dá)到平衡 | 分析之前應(yīng)有足夠的時(shí)間使系統(tǒng)平衡 |
系統(tǒng)泄漏 | 檢查并進(jìn)行維修 | |
流動(dòng)相污染或分解 | 清洗溶劑貯液瓶、清洗溶劑入口過(guò)濾器、使用HPLC級(jí)試劑 | |
柱被污染 | 沖洗柱或更換柱 | |
色譜柱填料流失或阻塞 | 更換色譜柱 | |
流動(dòng)相混合不均或混合器工作不正常 | 維修或更換混合器 | |
檢洌池被污染 | 用甲醇或其他強(qiáng)極性的溶劑沖洗流通池 | |
系統(tǒng)內(nèi)有氣泡 | 用強(qiáng)極性的溶劑清洗系統(tǒng) | |
檢測(cè)器內(nèi)有氣泡 | 清洗檢測(cè)器,在檢測(cè)器后面安裝背景壓力調(diào)節(jié)器 | |
檢測(cè)器燈能量不足 | 更換燈 |
12、規(guī)則基線噪音
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
規(guī)則基線噪音 | 流動(dòng)相、檢測(cè)器或泵內(nèi)有氣泡 | 流動(dòng)相脫氣,沖洗系統(tǒng)除去檢測(cè)器或泵內(nèi)的空氣 |
室溫不穩(wěn) | 穩(wěn)定環(huán)境溫度。使用柱溫箱、將系統(tǒng)置于恒溫、空氣對(duì)流小的環(huán)境 | |
流動(dòng)相回收使用 | 除非特殊需要不使用回收溶劑 | |
流動(dòng)相混合不完全 | 使流動(dòng)相混合均勻或使用低黏度的溶劑 | |
泵振動(dòng) | 在系統(tǒng)中假如脈沖阻尼器 | |
泵入口管路松或阻塞 | 檢查泵入口管路 | |
在同一水平上有其他設(shè)備 | 關(guān)掉儀器,檢查干擾是否來(lái)自于外部 |
三、從數(shù)據(jù)結(jié)果中分析
1、定量結(jié)果
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
精密度降低 | 樣品預(yù)處理時(shí)樣品降解或混入雜質(zhì) | 用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、檢查樣品處理過(guò)程,換新樣品 |
保留時(shí)間改變,峰形不正常 | 見“峰形不正常”的故障排除方法 | |
檢測(cè)器響應(yīng)故障 | 檢查檢測(cè)器 | |
峰積分不正確 | 重新設(shè)置參數(shù) | |
進(jìn)樣問(wèn)題(對(duì)外標(biāo)法) | 隨手動(dòng)進(jìn)樣器的類型不同而異,有下列情況:(1)如使用全部定量環(huán)的手動(dòng)進(jìn)樣器,在進(jìn)樣前需在“取樣”狀態(tài)下清洗三次;(2)如使用部分定量環(huán)的手動(dòng)進(jìn)樣器,進(jìn)樣量需少于定量喚體積的50%;(3)如使用注射器的手動(dòng)進(jìn)樣器,需確保進(jìn)樣操作重復(fù);(4)如使用自動(dòng)進(jìn)樣器需確保正確的進(jìn)樣體積,注射器不含空氣,樣品瓶有足夠的樣品,系統(tǒng)不泄漏;(5)如手動(dòng)進(jìn)樣器、自動(dòng)進(jìn)樣器都使用,應(yīng)確保系統(tǒng)的平衡。 | |
準(zhǔn)確度降低 | 峰積分不正確 | 見“精密度降低”的故障排除方法 |
迸樣問(wèn)題 | 見“精密度降低”的故障排除方法 | |
樣品預(yù)處理時(shí)樣品降解或混入雜質(zhì) | 用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、檢查樣品處理過(guò)程,換新樣品 | |
樣品蒸發(fā) | 樣品密封保存在適當(dāng)?shù)臏囟认?/span> | |
樣品前處理不當(dāng) | 檢查樣品的處理過(guò)程 | |
內(nèi)標(biāo)物配置不當(dāng) | 配置新的內(nèi)標(biāo)物 |
2、定性結(jié)果
現(xiàn)象 | 判斷 | 故障排除 |
峰不能分辨 | 改變保留時(shí)間 | 見“保留時(shí)間改變”的故障排除 |
數(shù)據(jù)處理裝置的參數(shù)不正確 | 適當(dāng)輸入?yún)?shù),進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)樣,提高準(zhǔn)確度 | |
無(wú)峰 | 改變保留時(shí)間 | 故障排除方法 |
數(shù)據(jù)處理裝置的參數(shù)不正確 | 重新適當(dāng)輸入?yún)?shù),進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)樣,提高準(zhǔn)確度 | |
鬼峰 | 見“鬼峰”可能的原因 | 見“鬼峰”的故障排除方法 |
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