選對色譜柱，快速開發(fā)方法
色譜分析中色譜柱的選擇是方法開發(fā)過程中重要的一步，對于分離效率具有重大影響。一旦選錯了色譜柱，將會無謂地延長和消耗方法開發(fā)和優(yōu)化的時間和精力。許多實驗室常常限制色譜柱的選用，常會將其方法建立在一種主流的色譜柱化學（例如慣用的端基封口的C18 色譜柱）上。然而，隨著色譜柱技術的發(fā)展，現(xiàn)在有了差異性不斷增加的基質顆粒和配體化學可供方法開發(fā)時篩查選擇性和改善分離之用。
本文通過眾多不同的色譜柱在選擇性上的變化的實例，概述選擇較優(yōu)色譜柱固定相的重要性。
跨越眾多色譜柱化學的樣品篩查使用配有色譜柱管理器的ACQUITY UPLC H-Class 系統(tǒng)完成?；衔锵疵摯涡虻淖兓ㄟ^UV和MS檢測器檢測。正確選擇色譜柱對于快速建立有效的方法和最大限度地降低進一步方法開發(fā)和優(yōu)化的需求是非常重要的。
儀器和耗材
Ziprasidone（齊拉西酮）堿降解樣品：將氫氧化鈉加入到Ziprasidone 標準溶液中，將反應液加熱2 小時，用酸中和，轉移至樣品瓶中供進樣用。
總之，Ziprasidone（齊拉西酮）堿降解樣品表明在各種色譜柱顆粒和配體上的非常不同的選擇性。若初始選擇BEH C18或HSS T3 則需要增加方法優(yōu)化步驟以便完全分離各個組份。相反，通過快速的寬范圍的色譜柱篩查，選擇早已表明良好分離的色譜柱則不必去做進一步方法開發(fā)工作。此例中，CSHC18由于其尖銳的峰形和雜質與主峰之間優(yōu)良的分離度而被選中。
結論
通盤考慮適宜的顆?；|和鍵合相化學選擇色譜柱對于快速開發(fā)有效的分離方法是一個重要工具。假如在開發(fā)新方法時一開始就沒選對色譜柱將會導致昂貴的和不必要的后續(xù)優(yōu)化試驗。隨著色譜柱技術的進展，有日益增多的不同基質顆粒和配體的色譜柱可供選擇，用以優(yōu)化色譜性能。對于任何基質中的組份分離，通過寬范圍的色譜柱化學篩查樣品的做法值得推崇。
氣相色譜柱是一種常用的色譜柱產(chǎn)品，在石油、化工、生物化學、醫(yī)藥衛(wèi)生、食品工業(yè)、環(huán)保等方面應用很廣。
氣相色譜柱的工作原理
色譜柱利用色譜柱先將混合物分離，然后利用檢測器依次檢測已分離出來的組分。色譜柱的直徑為數(shù)毫米，其中填充有固體吸附劑或液體溶劑，所填充的吸附劑或溶劑稱為固定相。與固定相相對應的還有一個流動相。流動相是一種與樣品和固定相都不發(fā)生反應的氣體，一般為氮或氫氣。 待分析的樣品在色譜柱頂端注入流動相，流動相帶著樣品進入色譜柱，故流動相又稱為載氣。載氣在分析過程中是連續(xù)地以一定流速流過色譜柱的;而樣品則只是一次一次地注入，每注入一次得到一次分析結果。 樣品在色譜柱中得以分離是基于熱力學性質的差異。固定相與樣品中的各組分具有不同的親合力(對氣固色譜儀是吸附力不同，對氣液分配色譜儀是溶解度不同)。當載氣帶著樣品連續(xù)地通過色譜柱時，親合力大的組分在色譜柱中移動速度慢，因為親合力大意味著固定相拉住它的力量大。親合力小的則移動快。
檢測器對每個組分所給出的信號，在記錄儀上表現(xiàn)為一個個的峰，稱為色譜峰。色譜峰上的極大值是定性分析的依據(jù)，而色譜峰所包羅的面積則取決于對應組分的含量，故峰面積是定量分析的依據(jù)。一個混合物樣品注入后，由記錄儀記錄得到的曲線，稱為色譜圖。分析色譜圖就可以得到定性分析和定量分析結果。
裝填好的色譜柱連接在高效氣相色譜儀上后，先試壓和試漏，然后在恒溫下用載氣吹洗數(shù)小時，再進行分析，此過程稱為色譜柱老化。
一、色譜柱老化的目的：
1、任何制作好的新柱，在色譜柱涂漬過程中難免柱內殘留有機溶劑，任何固定液都有低沸點的不純物，不經(jīng)老化就用于分析，上述低沸點物質大量從柱中流出，會造成基線不穩(wěn)，有時還會污染檢測器。
2、促使固定液均勻牢固地分布在載體和色譜柱內壁，提高柱分離效能，消除不良影響。
3、促使色譜柱內固定相排布更加緊湊和均勻，提高柱性能并使其穩(wěn)定。
裝填好的色譜柱經(jīng)過老化后，柱效和性能穩(wěn)定了，才可使用。
二、色譜柱老化注意事項：
1、新制作好的色譜柱老化時一定不能接檢測器，否則容易污染檢測器。
2、老化溫度應高于分析使用溫度25℃以上，但不能超過固定液允許的最高使用溫度。
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