（2010版藥典978頁(yè)）
進(jìn)樣：20μL
高效液相色譜儀高壓輸液系統(tǒng)由貯液器、高壓輸液泵、過(guò)濾器、脫氣裝置和梯度洗脫裝置等組成。
一、貯液器：
貯液器用來(lái)提供足夠數(shù)量的符合要求的流動(dòng)相，以完成分析工作。所有溶劑在放入貯液罐前必須經(jīng)過(guò)0.45um濾膜過(guò)濾，除去溶劑中的機(jī)械雜質(zhì)，以防輸液管道和進(jìn)樣閥產(chǎn)生阻塞現(xiàn)象。
1、對(duì)貯液器的要求：
?。?）必須有足夠的容積，以備重復(fù)分析時(shí)保證供液。
?。?）脫氣方便。
?。?）能耐一定的壓力。
?。?）所選用的材質(zhì)對(duì)所使用的溶劑都是惰性的。
2、貯液器材質(zhì)：
一般采用不銹鋼、玻璃、聚四氟乙稀、特種塑料聚醚醚酮（PEEK）襯里為材料。
3、貯液器容積：
一般為0.5～2L為宜。
二、高壓輸液泵：
1、類型：
有恒流泵和恒壓泵。
2、發(fā)展趨勢(shì)：
（1）高效：填料顆粒小，分離效率高，柱壓降大，泵工作壓力大。
?。?）分析時(shí)間短：流速更快，柱壓降大。
?。?）減少洗脫液用量。
?。?）多元洗脫。
三、過(guò)濾器：
在高壓輸液泵的進(jìn)口及它的出口與進(jìn)樣閥之間應(yīng)設(shè)置過(guò)濾器。高壓輸液泵的活塞和進(jìn)樣閥閥芯的機(jī)械加工精密度非常高，微小的機(jī)械雜質(zhì)進(jìn)入流動(dòng)相，會(huì)導(dǎo)致上述部件的損壞。同時(shí)，機(jī)械雜質(zhì)在柱頭上的積累會(huì)造成柱壓升高，使色譜柱不能正常工作。常見(jiàn)的過(guò)濾器有溶劑過(guò)濾器和管道過(guò)濾器。
過(guò)濾器的濾芯采用不銹鋼燒材料，孔徑為2～3um，耐有機(jī)溶劑的侵蝕。若發(fā)現(xiàn)過(guò)濾器堵塞（發(fā)生流量減小現(xiàn)象），可將其浸入稀HNO3溶液中，在超聲波清洗器中用超聲波振蕩10～15min，即可將堵塞的固體雜質(zhì)洗出。若清洗后仍不能達(dá)到要求，則應(yīng)更換濾芯。
四、脫氣裝置：
所有溶劑在使用前必須脫氣。因?yàn)樯V柱是帶壓力操作的，而檢測(cè)器是在常壓下工作。若流動(dòng)相中所含的空氣不除去，則流動(dòng)相通過(guò)色譜柱時(shí)其中的氣泡受到壓力而壓縮，流出色譜柱后到檢測(cè)器時(shí)因常壓而將氣泡釋放出來(lái)，造成檢測(cè)器噪聲增大，使基線不穩(wěn)，儀器不能正常工作。這在梯度洗脫時(shí)尤其突出。
脫氣裝置有離線超聲波振蕩脫氣、在線惰性氣體鼓泡吹掃脫氣和在線真空脫氣等裝置。
五、梯度洗脫裝置：
分低壓梯度和高壓梯度。
標(biāo)簽: 高效液相色譜儀 高效液相色譜儀 高效液相色譜儀高壓輸液系統(tǒng)_高效液相色譜儀 高效液相色譜儀色譜柱的正確操作色譜柱是高效液相色譜儀最主要的部件，被測(cè)物質(zhì)能否被很好的分離和測(cè)定，色譜柱的性能起著決定性的作用。因此，在日常工作中，應(yīng)特別注意色譜柱的正確使用和維修保養(yǎng)，以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。
1、使用預(yù)柱和保護(hù)柱 預(yù)柱(pre-column)安裝于泵和進(jìn)樣器之間，它給色譜柱中的流動(dòng)相提供了完全的平衡，并防止了對(duì)柱填料有破壞作用的組分或污染物進(jìn)入色譜柱。保護(hù)柱(guardcolumn)可以阻擋能夠牢固地吸附于色譜柱上的組分進(jìn)入色譜柱，保護(hù)柱應(yīng)與色譜柱的填料相同。預(yù)柱和保護(hù)柱可以經(jīng)常更換，而不需要經(jīng)常更換色譜柱，這就延長(zhǎng)了色譜柱的使用壽命?！ ?i>2、防止氣體進(jìn)入 有些色譜柱(如凝膠柱)是不允許氣泡進(jìn)入的，否則將會(huì)使柱效降低甚至形成微小的難以驅(qū)除的氣室。因此，為了防止氣泡進(jìn)入色譜柱，一定要使用經(jīng)過(guò)脫氣的流動(dòng)相，并且要嚴(yán)格按照下列步驟來(lái)安裝色譜柱。a、拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲，觀察是否有溶劑滲出；b、如有溶劑滲出，即可將色譜柱接到管路上，以避免氣泡的進(jìn)入；c、如無(wú)溶劑滲出時(shí)，表明色譜柱的此端已經(jīng)進(jìn)去空氣了，此時(shí)，可將色譜柱的出口端接到進(jìn)樣閥上，以流動(dòng)相來(lái)反方向沖洗色譜柱，以便將柱內(nèi)的空氣排除?？梢砸?、2ml/min的小流量來(lái)沖色譜柱，如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會(huì)導(dǎo)致柱性能的降低；d、如果流出的溶劑里不含有氣泡，說(shuō)明柱內(nèi)的氣體已經(jīng)被排出了，再將色譜柱以正確的方向接好，這樣氣泡就進(jìn)不到色譜柱里面了?！ ?i>3、清洗 為了不使被測(cè)物質(zhì)和雜質(zhì)停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后，都應(yīng)及時(shí)地清洗色譜柱。首先要用對(duì)被測(cè)樣品洗脫能力強(qiáng)的溶劑來(lái)洗脫色譜柱，以分析工作中常用的反相色譜分析法為例，因其先流出的物質(zhì)是極性大的物質(zhì)，此時(shí)應(yīng)用100%的甲醇或使用異丙純、四氫呋喃等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內(nèi)的極性小的物質(zhì)洗脫下來(lái)，洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可。如果流動(dòng)相是緩沖溶液，則應(yīng)先用蒸餾水來(lái)沖洗色譜柱，以沖掉柱內(nèi)的鹽，然后再用合適的溶劑來(lái)沖洗?！ ∧z濾過(guò)色譜法(GelFiltrationChromatography)中所使用的凝膠柱常用緩沖溶液做流動(dòng)相，用完之后當(dāng)然要用蒸餾水來(lái)沖洗。如果是連續(xù)操作，可以將緩沖溶液置于柱內(nèi)過(guò)夜，但可以是維持小流速(＜0、5ml/min)以防止緩沖鹽的析出，如果流動(dòng)相中含有鹵化物，即使是停一夜，也必須要用蒸餾水將色譜柱沖洗干凈，以防止它們對(duì)柱體的腐蝕?！ ?i>4、存放 如果色譜柱暫時(shí)不用，存放時(shí)要注意以下幾點(diǎn)： a、幾天之內(nèi)的短期放置，應(yīng)先用溶劑沖洗好色譜柱(如凝膠柱則用蒸餾水來(lái)沖洗)，再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可?！ 、如果色譜柱長(zhǎng)期不用，僅用上述方法來(lái)處理就不行了，這時(shí)應(yīng)使用色譜柱使用說(shuō)明書(shū)中所指明的溶劑來(lái)充滿色譜柱，反相柱一般使用甲醇，正相柱則可用正已烷或庚烷，而凝膠柱則不能用水了，因柱內(nèi)如果有微生物的生長(zhǎng)則會(huì)使柱效降低，此時(shí)應(yīng)用0、05%的NaNs水溶液(防腐劑)來(lái)沖洗色譜柱，再將色譜柱封嚴(yán)。色譜柱長(zhǎng)期放置時(shí)，一定要將色譜柱的兩端封嚴(yán)，以防止由于溶劑揮發(fā)而造成的柱填料干縮現(xiàn)象，因這可導(dǎo)致柱效的嚴(yán)重降低?！ 、色譜柱應(yīng)貯存在室溫下，如果放置于0℃以下的環(huán)境里，柱內(nèi)就會(huì)結(jié)冰，這也將導(dǎo)致柱效的降低。
標(biāo)簽: 色譜柱 色譜柱 高效液相色譜儀色譜柱的正確操作_色譜柱
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