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電泳槽的主要分類及配置組成 電泳槽常見問題解決方法

時間:2020-08-29    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  電泳槽是凝膠電泳系統(tǒng)的核心部分,其系統(tǒng)的迅猛發(fā)展主要也是體現(xiàn)在電泳槽上。根據(jù)電泳的原理,凝膠都是放在兩個緩沖腔之間,電場通過凝膠連接兩個緩沖腔。緩沖液和凝膠之間的接觸可以是直接的液體接觸,也可以間接通過凝膠條或?yàn)V紙條。管狀凝膠電泳和垂直板狀電泳大多采取直接液體接觸方式。這種方式可以有效地使用電場,但在裝置設(shè)計上有一些困難,如液體泄漏,電安全和操作麻煩等問題。水平板狀電泳槽大多通過間接方式,用濾紙橋搭接
一、電泳槽的分類:
圓盤:有上,下兩個電泳槽和帶有鉑金電極的蓋。上槽中具有若干孔,孔不用時,用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插電泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。電泳管的內(nèi)徑早期為5~7mm,為保證冷卻和微量化,現(xiàn)在則越來越細(xì)。
垂直板:基本原理和結(jié)構(gòu)與圓盤電泳槽基本相同。差別只在于制膠和電泳不在電泳管中,而是在兩塊垂直放置的平行玻璃板中間。
水平:的形狀各異,但結(jié)構(gòu)大致相同。一般包括電泳槽基座,冷卻板和電極。
二、電泳槽的配置:
槽體采用PVC塑料或PP純塑板槽。電泳槽體應(yīng)由二部分組成;主槽(工作槽),溢流槽(加料槽),另外應(yīng)配備循環(huán)過濾系統(tǒng)級加熱,冷卻及溫控系統(tǒng),溢流槽的寬度約為主槽的1/6,便于安裝加熱,冷卻管。為了防止涂料沉淀,電泳主槽底部采用斜面設(shè)計,電泳主槽的寬度=2*(100-300)+零件的寬度+極板與槽壁的距離。2(100-200)--表示兩邊電泳板與零件的較小距離為100-200,對于大平面零件,應(yīng)大于200mm;電泳槽長度=掛具加零件的總寬度+(50至100mm)*2+溢流槽寬度;(50至100)-表示零件距離底壁50-100mm。

電泳槽的常見問題解決介紹

    電泳槽時凝膠時間不對,那么通常膠在60min,1H內(nèi)凝;

    如果凝的太慢,可能是TEMEN,APS劑量不夠或者失效。

    APS應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用,TEMED不穩(wěn)定,容易被氧化成黃色。

    如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量過多,此時膠太硬易裂,電泳時易燒膠。

    紋理和托尾現(xiàn):

    由于樣品溶解不佳引起的,克服的方法可以在加樣前離心,增加一些增溶輔助試劑如尿素。

    蛋白帶過寬,與鄰近泳道的蛋白帶相連時由于加樣量太多,可以減少上樣量。

    電泳時間比正常要長。

    可能由于凝膠緩沖系統(tǒng)和電極緩沖系統(tǒng)的PH選擇錯誤,即緩沖系統(tǒng)的PH和被分離物質(zhì)的等電點(diǎn)差別太小,或緩沖系統(tǒng)的離子強(qiáng)度太高。

    指示劑成微笑符號(指示劑前沿呈現(xiàn)向上的曲線形),說明凝膠的不均勻冷卻,中間部分冷卻不好,導(dǎo)致分子有不同的遷移率所致。

    指示劑成哭臉符號(指示劑前沿呈現(xiàn)向下的曲線形),由于電泳槽的裝置不合適,尤其是凝膠和玻璃板組成的“三明治”底部有氣泡或靠近隔片的凝膠聚合不完全。

 

 

標(biāo)簽: 電泳槽 電泳槽 電泳槽的常見問題解決介紹_電泳槽



    電泳槽密封條漏液(垂直槽)一般情況下,電泳槽較窄的密封條不易漏夜,反之較寬的則比較容易漏,此時先檢查:1、密封條是否老化或損壞,若已經(jīng)老化或損壞,應(yīng)更換密封條。2、如果密封條完好無損,目測檢查密封條是否有凹凸不平現(xiàn)象,如果有應(yīng)將密封條拆下進(jìn)行重新安裝。安裝時注意不要拉扯密封條,使其自然地嵌入密封槽內(nèi),并保證安裝均勻,避免密封條出現(xiàn)凹凸現(xiàn)象。3、如果緩沖液是從密封條的中間漏出,則說明漏處比兩邊凹(不在同一水平線上),我們則需要把密封條拆下,清理干凈槽內(nèi)膠粘劑,然后再將薄厚相當(dāng)?shù)恼厳l(如0.4毫米)粘在槽內(nèi),以墊起凹下的密封條,使其與兩邊保持一致,此后再將密封條粘在槽內(nèi)即可。

    電泳槽內(nèi)無電流(鉑緊電極上無氣泡)1、首先利用萬用表檢查電泳儀有無輸出電壓(注意選擇直流電壓擋,輸出不得超過量程,以免損壞萬用表)2、利用萬用表電阻擋檢查電泳輸出線是否導(dǎo)通。3、利用萬用表電阻擋檢查電泳槽電極插座與鉑金絲之間是否可靠導(dǎo)通,重點(diǎn)檢查輸出插座與插頭是否與連接鉑金絲的焊片緊密連接,如發(fā)現(xiàn)松動請使用尖嘴鉗將其緊固即可,完畢進(jìn)行檢測若還沒有電流則檢查鉑金絲是否斷裂,若鉑金絲有斷裂跡象則用電烙鐵將其焊接,首先將助焊劑涂在鉑金絲上再用電烙鐵粘上焊錫將斷裂的兩段鉑金絲焊連即可。鋁扳散熱效果不佳先檢測鋁板與玻璃板之間有無縫隙,若有縫隙首先應(yīng)緊固螺栓,如果經(jīng)堅(jiān)固螺栓仍無法使鋁板與玻璃板帖平,可將鋁板拆下清理上面的污垢,根據(jù)縫隙的大小用相應(yīng)厚度的墊片將鋁板墊起,并保證鋁板的四邊平整(墊平后的鋁板平面應(yīng)低于密封條3-4毫米)。








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