氣相色譜儀定性分析就是要確定各色譜峰所代表的化合物。由于各種物質在一定色譜條件下均有確定的保留值，保留值可作為一種定性指標，目前各種色譜定性方法都是基于保留值定性的。但不同物質在同一色譜條件下，可能具有相似或相同的保留值，即保留值并非專屬，因此僅根據(jù)保留值對一個完全未知的樣品定性是困難的。如果在了解樣品來源、性質和分析目的的基礎上，對樣品組成作初步判斷，再結合下列方法，可確定色譜峰所代表的化合物。 一、利用已知純物質對照定性： 利用已知純物質對照定性是基于在一定操作條件下各組分的保留時間為定值，是色譜定性分析中較為方便的方法?！ 〖兾镔|對照定性僅適用于組分性質已有所了解、組成比較簡單、有純物質的未知物?！ ?i>二、根據(jù)相對保留值定性： 利用保留值定性時，必須使兩次分析條件完全一致，有時不易做到。有時利用相對保留值定性比利用保留值定性更方便、更可靠，只要保持柱溫不變即可。利用相對保留值定性要求找一個基準物質，通常選容易得到純品而且與被分析組分相近的物質作基準物質，如正丁烷、環(huán)己烷、正戊烷、苯、對二甲苯、環(huán)己醇和環(huán)己酮等?！?i> 三、利用已知物峰增高定性： 當未知樣品中組分較多，色譜峰過密，不易辨認時，或僅作未知樣品指定項目分析時，可用此法?！ ∈紫茸鞒鑫粗獦悠返纳V圖，然后在未知樣品中加入某已知物，又得到一個色譜圖，峰高增加的組分可能為這種已知物。 四、根據(jù)保留指數(shù)定性： 保留指數(shù)表示樣品在GC固定相上的保留行為，是目前使用廣泛并被國際公認的GC定性指標。 1、理論基礎： 正構烷烴的調整保留時間的對數(shù)（lgtr′）與其相應的碳數(shù)成線性關系。 2、計算方法： 保留指數(shù)是以正構烷烴作為標準，規(guī)定在任何色譜條件下正構烷烴的保留指數(shù)均為其分子中的碳數(shù)乘以100。待測樣品的保留指數(shù)IX是與待測樣品具有相同調整保留值的假想的正構烷烴中的碳數(shù)乘以100。測定時，將碳數(shù)為n和n+1的正構烷烴加到待測樣品中進行色譜分析，待測樣品的保留指數(shù)IX可按下式計算： IX=[n+（lgtr（X）′－lgtr（n）′）/（lgtr（n+1）′－lgtr（n）′）]×100 式中：tr（n+1）′＞tr（X）′＞tr（n）′ 五、利用經驗規(guī)律和文獻值定性： 當沒有待測組分的純標準樣品時，可利用GC經驗規(guī)律和文獻值進行定性?！ ?、碳數(shù)規(guī)律： 大量實驗證明，在一定溫度下，同系物的調整保留時間的對數(shù)與分子中的碳原子數(shù)成線性關系，即： lgtR′=A1n+C1 式中：A1和C1均為常數(shù)，n為分子中的碳原子數(shù)（n≥3）。 根據(jù)某一同系物中兩個或更多已知組分的調整保留時間的對數(shù)值，可求得同系物中其它組分的調整保留時間?！ ?、沸點規(guī)律： 同族中具有相同碳數(shù)碳鏈的異構體化合物，其調整保留時間的對數(shù)和它們的沸點成線性關系，即： lgtR′=A2Tb+C2 式中：A2和C2均為常數(shù)，Tb為組分的沸點（K）。 根據(jù)同族同碳數(shù)碳鏈異構體中兩個或更多已知組分的調整保留時間的對數(shù)值，可求得同族中具有相同碳數(shù)的其它異構體的調整保留時間?！ ?i>六、利用多柱定性： 對于復雜樣品，利用多柱定性更有效、更可靠，使原來在一根色譜柱上可能出現(xiàn)相同保留值的兩種組分，在另一根色譜柱上可能出現(xiàn)不同的保留值?！ 嶒灡砻?，同系物在兩種不同固定相上保留值的對數(shù)成線性關系。 七、利用多檢測器定性： 在相同的色譜條件下，同一樣品在不同的檢測器上有不同的響應信號，可利用檢測器的選擇性進行定性?！ 嶋H工作中多采用雙檢測器定性。雙檢測器可串聯(lián)，也可并聯(lián)。 八、利用化學反應定性： 1、利用衍生物定性： 有機物中某些難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定或極性很強的物質，如酸類、糖類、醇類和胺類等，可利用各種衍生反應生成衍生物后進行定性。這樣可克服直接分析的困難，使這些物質的分析變得比較容易。 對于GC可直接定性的未知物，如已初步定性，也可將未知物和標準物同時轉化成衍生物，如果未知物與標準物的保留值變化一致，則可認為它們是同一物質?！ ?、利用消除法定性： 利用某些官能團與化學試劑反應，使樣品中某組分消失而不出峰，以確定所消失的組分代表何種物質?！ ∠Х磻梢栽谥稀⒆⑸淦髦谢騿为毜奈⑿头磻苤羞M行，然后將反應物注入GC進行分析定性?！ ?、利用柱后流出物的化學檢驗定性： 收集色譜柱分離后的純組分，利用官能團分類試劑進行檢驗定性?！ ∈占椒ㄓ腥軇┕怖淠占ā⑷軇┙Y晶收集法和螺旋玻璃管冷凝收集法等。 也可將柱后餾出物直接通入盛有官能團分類試劑的檢驗管，利用官能團特征反應對各種餾出物進行定性?！ ?i>九、利用GC與其它儀器聯(lián)用定性： GC具有很強的分離能力，適合多組分混合物的定量分析，但定性分析常因沒有純物質或幾種物質的保留值相近而發(fā)生困難，因此，對復雜混合物的定性分析難以做出正確判斷。而質譜、紅外光譜和核磁共振譜等特別適合單一組分的定性，將GC與其聯(lián)用，能發(fā)揮各自的長處，可解決復雜混合物的定性問題?！ ÷?lián)用方式有不在線和在線兩種。不在線是將色譜柱分離的組分收集后，再進入其它儀器進行定性。在線是色譜柱分后的組分直接進入其它儀器進行定性。后一種發(fā)展十分迅速，目前已發(fā)展了各種形式的聯(lián)用儀器，其中以色質聯(lián)用比較有效，是鑒別復雜混合物強有力的工具之一。
標簽: 色譜儀 色譜儀 色譜儀的定性分析_色譜儀
高速逆流色譜法于1982年由美國國立衛(wèi)生院Ito博士研制開發(fā)的一種新型的、連續(xù)高效的液液分配色譜技術，與其它色譜技術不同的是它不需任何固態(tài)載體，因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應而導致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響。
同時它也具有適用范圍廣、快速、進樣量大、費用低、回收率高等優(yōu)點。因此，己在生物、醫(yī)藥、食品、材料、化妝品和環(huán)保等領域獲得了廣泛的應用，尤其是在天然產物活性成分的分離純化領域倍受重視。
高速逆流色譜儀原理及特點
利用了一種特殊的流體動力學（單向流體動力學平衡）現(xiàn)象。具體表現(xiàn)為一根100多米長的螺旋空管，注入互不相溶的兩相溶劑中的一相作為固定相，然后作行星運動；同時不斷注入另一相（流動相），由于行星運動產生的離心力場使得固定相保留在螺旋管內，流動相則不斷穿透固定相；這樣兩相溶劑在螺旋管中實現(xiàn)高效的接觸、混合、分配和傳遞。由于樣品中各組分在兩相中的分配比不同，因而能使樣品中各組分得到分離。
應用范圍廣，適應性好。由于溶劑系統(tǒng)的組成與配比可以是無限多的，因而從理論上講HSCCC適用于任何極性范圍的樣品的分離，所以在分離天然化合物方面具有其獨到之處。并因不需固體載體，而消除了氣液色譜中由于使用載體而帶來的吸附現(xiàn)象，特別適用于分離極性物質和其它具有生物活性的物質。
重現(xiàn)性好。如果樣品不具有較強的表面活性作用，酸堿性也不強，那么多次進樣，其分離過程穩(wěn)定性都保持很好、峰的保留相對標準偏差也小于2%，重現(xiàn)性相當好。
高速逆流色譜是建立在單向性流體動力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法，它是在研究旋轉管的流體動力平衡時偶然發(fā)現(xiàn)的。當螺旋管在慢速轉動時，螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端。用某一相作移動相從一端向另一端洗脫時，另一相在螺旋管里的保留值大約50%，但這一保留量會隨著移動相流速的增大而減小，使分離效率降低。但使螺旋管的轉速加快時，兩相的分布發(fā)生變化。
當轉速達到臨界范圍時，兩相就會沿螺旋管長度完全分開，其中一相全部占據(jù)首端的一段，我們稱這一相為首端相，另一段全部占據(jù)尾端的一段，稱為尾端相。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征，在高的螺旋管轉動速下，如果從尾端送入首端相，它將穿過尾端相而移向首端，同樣，如果從首端相送入尾相，它將穿過首端相而移向螺旋管的尾端。
分離時，在螺旋管內首先注入其中的一相(固定相)，然后從合適的一端泵入移動相，讓它載著樣品在螺旋管中無限次的分配。儀器轉速越快，固定相保留越多，分離效果越好，且大大地提高了分離速度，故稱高速逆流色譜。
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