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銷售經理必懂的液相色譜儀常用術語 液相色譜如何操作

時間:2020-08-07    來源:儀多多儀器網    作者:儀多多商城     
液相色譜儀作為常用分析檢測設備,價格比較貴,目前仍以進口為主。今天的跟大家分享的知識點是在本系列手冊氣相色譜分冊中已列出的色譜常用術語,一般不再重復,但考慮到系統(tǒng)的完整性,這里對某些重要概念再次給出相應說明。這里基于國家標準和最近發(fā)表的色譜文獻列出液相色譜常用符號、術語及對應的英文名稱。平面色譜、毛細管電泳、芯片中常用符號及術語將在相關部分介紹。
一、常用一般術語 定性分析(qualitative analysis)為檢測試樣中的元素、官能團或混合物的組成成分而進行的分析。
定量分析(quantitative analysis)為測定試樣中各種成分(如元素、根或官能團等)的合量而進行的分析。
常量分析(macro analysis)一般指試樣質量大于0.1g的分析,也可指被測組分量高于千分之一的分析。
半微量分析(semimicro analysis)一般指試樣質量在10~100mg的分析。
微量分析(micro analysis)一般指試樣質量在1~10mg的分析,也可指被測組分合量約為萬分之一至百萬分之一的分析。
超微量分析(ultramicro analysis)一般指試樣質量小于1mg或取樣體積小于0.01ml的分析。
痕量分析(trace analysis)指物質中被測組分質量分數(shù)小于0.01%的分析,也可指被測組分含量在百萬分之一以下的分析。
超痕量分析(ultra-trace analysis)物質中被測組分質量分數(shù)小于0.0001%的分析。
絕對誤差(absolute error)測量結果減去被測量的[約定]真值。
相對誤差(relative error)絕對誤差與被測量的[約定]真值之比。
隨機誤差(randomerror)在重復測量中按不可預見方式變化的測量誤差的分量。
系統(tǒng)誤差(systematic error)在重復測量中保持不變或按可預見方式變化的測量誤差的分量。
標準偏差(standard deviation)在對同一被測量進行n次測量時,表征測量結果分散程度的參數(shù),用符號S表示。
相對標準偏差(relative standard deviation,RSD)標準偏差(S)與算術平均值的絕對值之比。

測量不確定度(uncertainty of measurement)表征被測量的真值在某個量值范圍的、種估計。 測量不確定度一般包含多個分量,其中一些分量可在測量結果統(tǒng)計分布的基礎上進行估計,并可用標準偏差表征,其他分量只能基于經驗或由其他信息估計。
標準物質(standard material)具有足夠的準確度,可用以校準或檢定儀器、評定測量方法或給其他物質賦值的物質。
校準(calibration)在規(guī)定條件下為確定測量儀器或測量系統(tǒng)的示值與被測量相對應的已知值之間關系的一組操作。
校準液(calibration solution)準確知道其成分,用以校準儀器的溶液。通常由一種或多種校準組分和一種溶劑組成。
試驗溶液(test solution)已知其成分,用以對儀器進行試驗的溶液。
校準組分(calibration component)直接用于校準和測試的組分。
濃度(concentration)表示物質中不同組分之間相對量的一種數(shù)量標記。分析中常用的有質量濃度(單位為kg/L)、物質的量濃度(單位為mol/L)、質量摩爾濃度(單位為mol/kg)、質量分數(shù)(%)和體積分數(shù)(%)等。
試樣(sample)供試驗或分析用的被測物質。范圍(range)由上、下限所限定的一個量的區(qū)間。身徽 注:"范圍"通常加修飾語。例如:測量范圍、標度范圍等。量程(span)儀器測量上限值與下限值的代數(shù)差。
穩(wěn)定性(stability)在規(guī)定工作條件下,輸入保持不變,在規(guī)定時間內儀器示值保持不變的能力??梢杂昧砍唐?、零點漂移或基線漂移表示。
量程漂移(span drift)在規(guī)定工作條件下,規(guī)定時間內的量程變化。
零點漂移(zero drift)在規(guī)定工作條件下,規(guī)定時間內零點示值的偏移。
基線漂移(baseline drift)在規(guī)定工作條件下,規(guī)定時間內,儀器的響應信號隨時間定向的緩慢變化。
基線(base-line)在恒定的條件下,儀器的響應信號曲線。 液相色譜儀的基線是指在僅有流動相通過檢測系統(tǒng)時的響應信號曲線。
輸出波動(output fluctuation)又稱噪聲。

不是由被測組分的濃度或任何影響量變化引起的相對于平均輸出的起伏。


二、靈敏度與準確度 靈敏度(sensitivity)儀器的輸出量與輸入量之比,常用符號S表示。對于非線性響應的儀器,則為輸出量對輸入量的導數(shù)。 準確度(accuracy)示值與被測量真值(約定真
  【儀器網 維修保養(yǎng)】液相色譜柱在使用過程中常見的問題有柱壓升高、峰拖尾變寬、分離效果下降等。一般情況下這些都是色譜柱使用時間過長引起的正?,F(xiàn)象,只需對色譜柱進行清洗與再生便可解決。但是如果柱壓突然升高,則需要檢查色譜柱是否出現(xiàn)問題??赡艿脑蛴幸韵聨c:
 
  1.柱頭的過濾篩板被污染
 
  解決方法:卸下柱頭螺絲,將過濾篩板取下,放置在30%左右的稀硝酸中,然后用超聲波清洗10分鐘。再將過濾篩板放入超純水,超聲清洗約10分鐘,之后將過濾篩板重新裝回色譜柱。
 
  2.填料被污染
 
  解決方法:
 
 ?、傩断轮^螺絲,將前端被污染的填料用專用小匙挖出,然后重新填入相同的填料。
 
 ?、谶x擇合適的流動相,按色譜柱使用的方向沖洗,沖洗量須大于色譜柱體積的20倍,將污染物溶解并沖出色譜柱,然后,按照色譜柱標明的箭頭方向使用。
 
  3.緩沖鹽溶液遇到純有機相析出鹽結晶,堵塞色譜柱
 
  解決方法:先用沖洗色譜柱,將鹽晶體溶解并沖出色譜柱,然后換高濃度甲醇水溶液或其他有機溶劑作為流動相。
 
  4.流動相的PH值偏差過大,造成固定相溶解或結構被破壞
 
  解決方法:此時很難將色譜柱修復通常需要直接更換色譜柱。

?1、色譜柱的使用說明:

 ?。?)色譜柱使用前注意事項:

  色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。

  (2)流動相:

  流動相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動相的水可以是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動相再經過0.45μm的濾膜過濾一次則更好,尤其是含鹽的流動相。另外,裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線過濾器等裝置應該定期清洗或更換。

  以常規(guī)硅膠為基質的鍵合相填料通常的PH值適用范圍是2.0-8.0,BDS C18適合于堿性化合物,PH值適用范圍為2.0-10.0。當必須要在PH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時,每次使用結束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動相互溶的溶劑清洗,并完全置換掉原來所使用的流動相。

 ?。?)樣品:

  樣品也要盡可能清潔,可選用樣品過濾器或樣品預處理柱(SPE)對樣品進行預處理;若樣品不便處理,要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時,所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。

2、色譜柱的保存

 ?。?)反相色譜柱每天實驗后的保養(yǎng):

  使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。

 ?。?)長期保存色譜柱:

  如色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度可以是室溫。

3、色譜柱的再生

  因為色譜柱是消耗品,隨著使用時間或進樣次數(shù)的增加,會出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰的現(xiàn)象,一般來說可能是柱效下降。

 ?。?)反相柱的再生:依次采用20-30倍的色譜柱體積的甲醇:水=10:90 (V/V),乙腈,異丙醇作為流動相沖洗色譜柱,完成后再以相反順序沖洗色譜柱。

 ?。?)正相柱的再生:依次以20-30倍色譜柱的體積的正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作為流動相沖洗色譜柱,然后再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意上述溶劑必須嚴格脫水。

4、色譜柱在使用過程中易出現(xiàn)的問題和解決辦法

  色譜柱在使用中較為常見的問題就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正?,F(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高(系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外),以下列舉了部分常見原因及解決辦法:

  (1)色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染;

  解決方法:如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。

 ?。?)色譜柱頭的填料被樣品污染;

  解決方法:如確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復后,重新安裝上柱頭螺絲。

 ?。?)色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結晶析出;

  解決方法:如確定定是鹽結晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。

 ?。?)流動相PH值過大或過小使固定相結構破壞或溶解。

  解決方法:如果因PH值使用不當,很難恢復。



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