熒光分光光度計是什么呢?熒光分光光度計計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器，具有靈敏度高、選擇性好、操作簡便等優(yōu)點。熒光分光光度計主要由哪些部件組成呢?下面小編就來具體介紹一下，希望可以幫助到大家。
1. 光源：
為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈，后者能發(fā)射出強度較大的連續(xù)光譜，且在300nm～400nm 范圍內(nèi)強度幾乎相等，故較常用。
2.激發(fā)單色器：
置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或第一單色器，篩選出特定的激發(fā)光譜。
3.發(fā)射單色器：
置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器，常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。
4. 樣品室：
通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時，光源與檢測器成直角安排;測量固體時，光源與檢測器成銳角安排。
5. 檢測器：
一般用光電管或光電倍增管作檢測器?？蓪⒐庑盘柗糯蟛⑥D(zhuǎn)為電信號。
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息?？梢杂脴?biāo)準光圖譜再結(jié)合其它手段進行定性分析。
根據(jù)Lambert-Beer定律說明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說明光的吸收與溶液濃度成正比;如果同時考慮吸收層厚度和溶液濃度對光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對溶液進行定量分析。
將分析樣品和標(biāo)準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確，精密度高，且測定條件要相同。
實驗證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。
在水和廢水監(jiān)測中的應(yīng)用，對于一個水系的監(jiān)測分析和綜合評價，一般包括水相(溶液本身)、固相(懸浮物、底質(zhì))、生物相(水生生物)。在水質(zhì)的常規(guī)監(jiān)測中，紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復(fù)雜多變，待測物的濃度和干擾物的濃度差別很大，在具體分析時必須選擇好分析方法。
在農(nóng)產(chǎn)品和食品分析中可用于檢測的組分或成分有蛋白質(zhì)、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、砷、汞等;
在植物生化分析中可用于檢測葉綠素、全氮和酶的活力等;
在飼料分析中可用于檢測煙酸、棉酚、磷化氫和甲酯等。
1、儀器常見故障發(fā)生的原因：
出庫的儀器都是經(jīng)過調(diào)試、老化和檢驗通過的儀器，所以在正常的存儲、搬運與使用中不應(yīng)該有問題的出現(xiàn)，在儀器的使用過程中出現(xiàn)的問題主要原因在于：
1）、存儲和使用環(huán)境的惡劣導(dǎo)致電器零部件和光學(xué)件的損壞
2）、不適當(dāng)?shù)陌徇\導(dǎo)致儀器緊錮部件的松動或易損器件的損壞
3）、用戶的誤操作
4）、燈的使用超過其壽命時間
5）、電器件的老損
6）、用戶電網(wǎng)的不穩(wěn)定
2、儀器常見故障的種類：
1）、聯(lián)機問題
2）、穩(wěn)定性問題
3）、自檢通不過
4）、其它問題
3、儀器常見故障的分析與解決：（軟件不屬于標(biāo)配）
1）、聯(lián)機問題：
①、重新閱讀用戶使用說明書中關(guān)于聯(lián)機的部分，按照說明書上的步驟重新做一遍。
②、確認電腦與儀器的USB連接線是否聯(lián)好。
③、確認電腦中是否有兩個或兩個以上的本儀器應(yīng)用軟件在工作，電腦是否死機，（電腦注銷或重新啟動）。
④、確認有沒有其它軟件占用此串行口（關(guān)掉此應(yīng)用軟件）。
⑤、確認儀器已經(jīng)自檢完畢，屏幕上有沒有顯示“聯(lián)機字樣”（關(guān)掉儀器重新啟動）。
⑥、確認是否在電腦上插上儀器應(yīng)用軟件的加密狗。
⑦、電腦串行口是否已損壞（重新?lián)Q臺電腦試一下）。
⑧、應(yīng)用軟件是否對。
⑨、與供應(yīng)商或廠商的技術(shù)員。
2）、穩(wěn)定性問題：
①、紫外區(qū)（190nm-339nm）不穩(wěn)：
A、預(yù)熱時間未到30分鐘，多預(yù)熱一會兒。
B、波長出錯引起的，（選擇系統(tǒng)校正，分別做一次暗電流校正和波長校正。注意自檢時樣品室蓋要蓋好，樣品室中不能放任何東西，四聯(lián)樣品池架停在一個固定的檔位上）。
C、檢查、計算一下氘燈的壽命是否已到（一個氘燈的壽命約為2000小時）。
D、分別看一下200nm和220nm波長下的穩(wěn)定性，如果200nm穩(wěn)定性不好而220nm穩(wěn)定性是好的，說明是能量問題或光路的問題，有儀器知識基礎(chǔ)的可以自己動手檢查或微調(diào)一下光斑。
E、分別看一下220nm和250nm波長下的穩(wěn)定性，如果220nm穩(wěn)定性不好而250nm穩(wěn)定性是好的，說明是長時間的包裝，使包裝上的氣味進入儀器內(nèi)部引起的，讓儀器擺放一段時間即可。
F、分別看一下250nm和可見區(qū)任意波長下的穩(wěn)定性，如果250nm穩(wěn)定性不好而可見區(qū)是好的，說明是氘燈或氘燈電源 的問題，更換氘燈，或與供應(yīng)商或廠商的技術(shù)人員。
G、紫外區(qū)和可見區(qū)穩(wěn)定性都不好是放大板及其供應(yīng)電源的問題。
H、與供應(yīng)商或廠商的技術(shù)人員。
②、可見區(qū)（340nm-1100nm）不穩(wěn)：
A、預(yù)熱時間未到30分鐘，多預(yù)熱一點時間。
B、波長出錯引起的，（選擇系統(tǒng)校正，分別做一次暗電流校正和波長校正。注意自檢時樣品室蓋要蓋好，樣品室中不能放任何東西，四聯(lián)架停在一個固定的檔位上）。
C、檢查、計算一下鎢燈的壽命是否已到（一個鎢燈的壽命約為2000小時）。
D、分別看一下1000nm和500nm波長下的穩(wěn)定性，如果1000nm穩(wěn)定性不好而500nm穩(wěn)定性是好的，說明是能量問題或光的問題，有基礎(chǔ)的自己動手檢查或微調(diào)一下光斑。
E、紫外區(qū)和可見區(qū)穩(wěn)定性都不好，可能是放大板及其供應(yīng)電源的問題。
F、與供應(yīng)商或廠商的技術(shù)人員。
3）、自檢通不過：
我們所說的真正意義上的自檢，包括開機時的功能檢查和系統(tǒng)應(yīng)用中的波長校正功能，
本儀器的ROM是掉電可保存的，它可以存儲儀器的系統(tǒng)參數(shù)，所以開機所做的只是對儀器功能諸如：濾色片定位，切換定位，氘燈、鎢燈開關(guān)、光電池能量檢查和暗電流大小的檢查等，在每一步檢查不過時，它都會打錯號并蜂鳴提示，出現(xiàn)如此情況我們只要檢查相應(yīng)功能的關(guān)聯(lián)器件即可。
儀器很多是由于用戶誤操作或搬運引起的問題，都可以通過波長校正來解決，因為儀器如果波長都不對了，在去看其他的指標(biāo)和測試都沒有意義了，換句話說如果波長錯了便可以引發(fā)各種各樣的問題。所以碰到諸如：不穩(wěn)、測出的數(shù)據(jù)不對、掃描的峰值不對等，都可以先自檢一下波長（具體操作方法參照操作方法）。
①、濾色片通不過：
A、電機不轉(zhuǎn)（驅(qū)動芯片微機板上的62083壞、微機板上的3號8255壞或電機壞）
B、不能正常定位（光耦壞、光耦線接觸性不好或1號8255壞）
②、切換通不過：
A、電機不轉(zhuǎn)（驅(qū)動芯片微機板上的62083壞、微機板上的3號8255壞或電機壞）
B、反方向轉(zhuǎn)或碰到開關(guān)不停（微動開關(guān)壞、微動開關(guān)線接觸不好或1號8255壞）
③、光電池通不過：
A、供應(yīng)放大板的+/-15V沒有（電源板上7815/7915壞或3芯線接觸不好），
B、8325壞、短路或供其5V電壓沒有（放大板上78L05壞）
C、3040的3腳輸出4.08V沒有（3040壞）
D、濾色片位置錯。
E、3140或OP07壞
F、78E516B壞或放大板到微機板的信號線接觸性不好
④、波長校正出錯：
A、自檢時（開樣品室蓋或里面放東西）導(dǎo)致波長出錯
B、樣品室四孔架沒有在檔位而遮光
C、氘燈不亮（氘燈壞、氘燈電源板壞、氘燈開關(guān)壞或其開關(guān)信號不對）
D、光學(xué)件發(fā)霉導(dǎo)致能量低
E、波長電機先反轉(zhuǎn)后正轉(zhuǎn)（光耦壞、其線接觸性不好或1號8255壞）
F、濾色片電機失步或其位置信號不對
⑤、暗電流通不過：
A、暗電流過大或過?。ㄓ脩舸蜷_樣品室蓋子自檢）
B、放大板問題（與光電池通不過同）
4）、其它問題：
①、開機沒反應(yīng)：
A、檢查外接電源是否正常
B、檢查電源線，看是否電源線插頭接觸不良
C、檢查儀器主機保險管是否熔斷，如果是則更換保險管。
②、開機儀器在工作，但屏幕不顯示或顯示不清楚：
A、請檢查對比度調(diào)節(jié)旋鈕或打開罩殼調(diào)節(jié)微機板上的電位器
B、CPU78E516B、液晶或微機板上的1，2號8255壞，或顯示接線接觸性不好
③、打印機不工作，打印出錯：
A、檢查儀器打印機連線是否松動。
B、檢查系統(tǒng)應(yīng)用中打印機類型選擇是否正確，如果是內(nèi)置打印機，請選擇面板式，如果是外置打印機，請選擇平臺式。
④、樣品檢測不穩(wěn)定：
A、確認儀器是否正常自檢。
B、在當(dāng)前測量狀態(tài)下，取出比色皿，樣品池為空狀態(tài)，按ZERO，查看吸光度0.000Abs，是否跳動，如果在±0.002之間跳動為正常，如果跳動太大，請確認外部電源是否為穩(wěn)壓電源，確認完成后關(guān)閉儀器電源重新自檢，確認自檢正常。如果樣品池為空，按ZERO，查看吸光度0.000Abs跳動是否正常。
C、測量的樣品是否揮發(fā)性太大，請使用比色皿蓋子，如果是苯蒸氣等強揮發(fā)性氣體，請敞開樣品池去除干擾氣體后測量。
D、確認是否正確使用空白溶液校零。根據(jù)相關(guān)規(guī)定，用來校零的空白溶液的吸光度值
不應(yīng)該超過0.4Abs，如果超過請檢查或更換空白溶液或參比溶液。
⑤、測量樣品重復(fù)性差：
A、確認樣品是否穩(wěn)定，樣品是否有光解等現(xiàn)象；
B、請檢查比色皿擦拭方法是否正確，應(yīng)仔細擦拭、清洗比色皿。
⑥、測量樣品吸光度不準確：
A、在系統(tǒng)應(yīng)用中進行“暗電流校正”，校正完成后重新校正空白溶液，再測量，
B、比色皿配對性不好，請檢查比色皿的配對性。
449717568
