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熒光分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)和主要部件 光度計(jì)是如何工作的

時(shí)間:2020-08-05    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
熒光分光光度計(jì)常用的檢測(cè)器是光電倍增管,但要進(jìn)行光學(xué)多通道檢測(cè)時(shí)則需要如光導(dǎo)攝像管等多道檢測(cè)器?! ?BR>  光導(dǎo)攝像管是一種真空管,由一個(gè)稱為靶的光敏區(qū)和另一個(gè)讀取信號(hào)的電子槍組成,而靶又由眾多的光二極管系列組成。光陰極受到光照射時(shí)發(fā)射的光電子被象聚焦柵和陽(yáng)極加速并成像于靶上,靶上的光電二極管產(chǎn)生電子和空穴的電荷載流并迅速移向兩極,從而把光量子數(shù)記錄下來(lái)。隨后用電子束掃描管靶,把光量子信號(hào)輸送到計(jì)算機(jī)的存貯器中累積和記錄,最后在顯示盤、記錄儀或陰極射線管示波器上顯示出來(lái)。
  【儀器網(wǎng) 維修保養(yǎng)】紫外分光光度法是利用物質(zhì)對(duì)紫外光譜區(qū)域內(nèi)的光具有選擇性吸收的現(xiàn)象,對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法 。用于測(cè)量和記錄待測(cè)物質(zhì)分子對(duì)紫外光的吸光度及紫外吸收光譜,并進(jìn)行定性定量以及結(jié)構(gòu)分析的儀器,稱為紫外吸收光譜儀或紫外分光光度計(jì)。
 
  維護(hù)與保養(yǎng)
 
  (1)儀器工作電源一般為 220V,允許有±10%的電壓波動(dòng)。為保持電源燈和檢測(cè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性,在電源電壓波動(dòng)較大的實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)該配備穩(wěn)壓器。
 
  (2)儀器室溫度應(yīng)控制在 18℃~30℃,濕度 30~60%。
 
  (3)為了延長(zhǎng)光源使用壽命,在不使用時(shí)不要開(kāi)光源燈。若工作間歇時(shí)間短,可不關(guān)燈或停機(jī)。一旦停機(jī),必須待燈冷卻后再重新啟動(dòng),并預(yù)熱15min。如燈泡發(fā)黑或亮度明顯減弱或不穩(wěn)定,應(yīng)及時(shí)更換。更換時(shí)不要用手直接接觸窗口或燈泡,避免油污黏附。若不小心接觸過(guò),要用無(wú)水乙醇擦試。
 
  (4)比色皿使用完畢,立即用溶劑沖洗4~5次。若仍不能沖洗干凈,先用乙醇沖洗(如銅、鐵、錳、鋅的測(cè)定),再用純化水或有機(jī)溶液沖洗干凈(注:比色皿的沖洗,切忌溶劑是有機(jī)溶劑時(shí),用畢直接用水沖洗,會(huì)造成溶質(zhì)析出, 附著在皿內(nèi)壁),并用擦鏡紙把水吸干。
 
  (5)每天操作使用結(jié)束后,應(yīng)仔細(xì)檢查樣品室內(nèi)是否有溶液溢出,若有溢出必須隨時(shí)用濾紙吸干,否則會(huì)引起測(cè)量誤差或影響儀器使用壽命。
 
  (6)儀器使用一段時(shí)間(一般每年1~3次),用鈥濾光片檢查波長(zhǎng)準(zhǔn)確度。
 
  (7)儀器使用前或搬動(dòng)后應(yīng)檢查并校正波長(zhǎng)精度。
 
  (8)儀器每次使用完畢,應(yīng)及時(shí)罩上防塵罩,在罩內(nèi)放入數(shù)袋硅膠,以免受潮積塵。
 
  (9)當(dāng)鹵鎢燈“泡殼”上出現(xiàn)嚴(yán)重發(fā)黑或燒毀,或者氘燈的燈絲折斷或漏氣時(shí),要及時(shí)更換新燈。
紫外分光光度計(jì)的選擇因素

    紫外分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室普及率很高的一種光譜儀器,由于靈敏度高、選擇性好、準(zhǔn)確度高、適用濃度范圍廣,而且分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速得到廣泛的應(yīng)用,長(zhǎng)期在分析領(lǐng)域扮演很重要的角色。

    在選擇這類儀器時(shí)要考慮哪些因素呢?

    1、光學(xué)構(gòu)造(OPTICALCONFIGURATION)

    一般來(lái)說(shuō),紫外光分光光度計(jì)分為單光束和雙光束兩類。顧名思義,單光束型主要是依賴單束光進(jìn)行測(cè)量。一束給定波長(zhǎng)的光通過(guò)對(duì)照物,然后再通過(guò)實(shí)際樣品溶液,就能得到吸光結(jié)果。

    雙光束型則是通過(guò)一個(gè)斬光輪(mirroredchopperwheel)將一束光分成兩束,分別測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品。

    可以最小化光漂移(lampdrift)和減少測(cè)量時(shí)間。一些雙光型光度計(jì)不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來(lái)代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測(cè)量對(duì)照樣品和目的樣品。

    因?yàn)樵黾恿藴y(cè)量的速度,所以雙光束分光光度計(jì)在測(cè)量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。

    2、光源和檢測(cè)方法(LIGHTSOURCESANDDETECTION)

    分光光度計(jì)的光譜也是需要考慮的一個(gè)重要因素。實(shí)驗(yàn)室研究人員希望省錢購(gòu)入專門儀器定量核酸、蛋白或者細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。

    例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長(zhǎng)下測(cè)量樣品。果果需要更大的靈活性,研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進(jìn)行ELISAs分析和比色分析。

    紫外分光光度計(jì)一般覆蓋190nm和380nm波長(zhǎng),通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。

    VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是這樣的儀器。

    一些儀器具有多種光源供選擇:

    紫外光、可見(jiàn)光和甚至紅外光(780nm至3,000nm)。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見(jiàn)光部分(大約380nm到800nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見(jiàn)光區(qū)域。

    分光光度計(jì)的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。可以投射出實(shí)驗(yàn)精確要求的光譜。

    一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測(cè)量??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。

    為了測(cè)量吸光值,分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管(photo-multipliertubes,PMTs)和光敏二極管。

    PMTs提供快速的反應(yīng)時(shí)間和良好的靈敏度,并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍。但一些制造商依賴于光敏二極管的動(dòng)態(tài)范圍在數(shù)秒內(nèi)行使所有的光譜測(cè)量。

    3、樣品類型(SAMPLEFORMAT)

    在大部分的樣品類型中,分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室需求。

    但盡管對(duì)于小實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō),制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來(lái)滿足通量的要求和減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

    用小試管cuvette裝樣品容量一般從1μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來(lái)滿足各種改變需要。體現(xiàn)了柔韌性。

    4、數(shù)據(jù)管理(DATAMANAGEMENT)

    大部分單機(jī)型的分光光度計(jì)包含了驅(qū)動(dòng)儀器運(yùn)行和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能的儀器,通常與PC機(jī)一起聯(lián)用,需要從制造商提供額外的軟件。同時(shí)用戶也可以選擇升級(jí)軟件以滿足他們的需要。

    另外一個(gè)值得考慮的因素是數(shù)據(jù)的最終使用。各獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室都有各自感興趣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

    例如一些藥物機(jī)構(gòu)需要考慮美國(guó)FDA的要求和歐聯(lián)盟的藥物評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)的要求選擇不同的數(shù)據(jù)處理方式。

標(biāo)簽: 紫外分光光度計(jì)
紫外分光光度計(jì)標(biāo)簽: 紫外分光光度計(jì)的選擇因素_紫外分光光度計(jì)組合標(biāo)題:

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