葛根是一種常用中藥，具有解肌退熱、生津、透疹、升陽止瀉之功效，葛根素是葛根中的主要活性成分之一。呈白色針狀結晶，能溶于水，但溶解度小，其水溶液為無色或微黃色。具有改善心腦血管循環(huán)、降低心肌耗氧量，降低血糖，防止高血壓及動脈硬化，提高機體免疫力，抗菌，抗病毒等多種藥理作用。葛根素因毒性小，安全范圍廣，療效好而臨床應用價值。
目前市場上葛根素有多種劑型，但是其劑型和標準各不相同，本文比較了兩種葛根素注射液的外觀質量和內在質量，并用HPLC測定了其主要有效成分葛根素的含量，具有方便、準確，便于控制產(chǎn)品的質量等優(yōu)點。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等，實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應用領域
化合物檢測、法醫(yī)毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
色譜條件：
色譜柱 | SymmetryC18柱（3.9mm×150mm，5μm） |
流動相 | 甲醇-水（體積比為35:65） |
檢測波長 | 250nm |
進樣量 | 10μL |
流速 | 1.0ml/min |
譜圖分析：
? 色譜柱在使用前，可以進行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是較佳條件)，只有這樣，測得的結果才有可比性。
1、樣品的前處理
a、可以使用流動相溶解樣品。
b、使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質。
c、使用0.45?m的過濾膜過濾除去微粒雜質。
2、流動相的配制
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點：
a、流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。
b、流動相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學反應(特殊情況除外)。
c、流動相的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果；同時降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。
d、流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器，可以使用對紫外吸收較低的溶劑配制。
e、流動相沸點不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導致實驗無法進行。
f、在流動相配制好后，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
3、流動相流速的選擇
因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱，要追求較佳柱效，可以使用較佳流速。對內徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1ml／min，對于內徑為4.0mm柱，流速0.8ml／min為佳。
當選用較佳流速時，分析時間可能延長?？刹捎酶淖兞鲃酉嗟南礈鞆姸鹊姆椒ㄒ钥s短分析時間(如使用反相柱時，可適當增加甲醇或乙腈的含量)。
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