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液相色譜使用三個常見問題 如何挑選購買液相色譜

時間:2020-07-20    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

液相色譜儀是我們化學類實驗室常用的儀器之一,使用若不注意就會出各種各樣的問題。實驗室的液相色譜儀卻罷工了,處處是問題。

問題一

 

儀器開啟之后泵不過液,壓力為零。自行拆下入口單向閥,用甲醇超聲單向閥芯,無效果,初步判斷入口單向閥芯堵塞。是什么樣的操作導致了單向閥堵塞?

 

解答:

該液相系統(tǒng)的泵為四元泵,四個通道中B、C兩通道是空的,已經(jīng)長期未用,其中B通道是純磷酸鹽已經(jīng)干涸,溶劑瓶內(nèi)壁和管路中有明顯的鹽結晶,C通道一直空著沒用過。(吐槽:BC通道不用也是要用有機溶劑封存起來的呀)正在使用的A,D兩個通道,A通道為甲醇,D通道為純水,純水中已經(jīng)有明顯的白色絮狀物。那么單向閥芯堵塞也就有拒可循了。用5%的稀硝酸和甲醇分別浸泡超聲入口單向閥芯均無效果,出口單向閥芯端無液體流出,小哥哥們上次超聲單向閥時簡單粗暴的直接扔進了500ml的試劑瓶中,并不是輕輕放入瓶中,那聲音相當清脆。這個閥芯應該是救不回來了。

 

 

要解決問題那就只能更換閥芯了更換單向閥芯的步驟:

 

1、卸下與單向閥連接的管路

2、用13號的扳手擰松單向閥

3、單向閥底部空間較小平移取出單向閥避免擠壓摩擦到閥芯,取出舊的單向閥芯。

4、更換新的閥芯,注意流向箭頭方向,手緊單向閥體,調(diào)整銀色螺母方向以便連接管路,擰緊單向閥。

 

單向閥更換完畢,開機試一下,正常泵液,設置實驗所需流速,工作正常,壓力正常。小哥哥小姐姐們的大難題已經(jīng)解決了。

 

問題二

 

泵屏幕上報警:后密封清洗系統(tǒng)清洗液跑空。清洗瓶中有液體,是純水而且也有白色絮狀物了。(吐槽:清洗瓶中應該貯存的是10%甲醇水。)蠕動泵正常工作,有液體輸送,仔細查看后發(fā)現(xiàn)微滴計數(shù)器管路連接錯誤。

 

這樣當蠕動泵關閉后理論上應該沒有液滴滴下,除非柱塞密封圈泄漏,微滴計數(shù)器可以的判斷柱塞密封泄露并報警提示。后密封清洗系統(tǒng)的作用還是非常重要的:

1.潤滑柱塞桿

2.使用buffer時防止產(chǎn)生鹽析

3.延長柱塞密封圈使用壽命

所以一定要確保后密封清洗系統(tǒng)正常工作。

 

問題三

 

檢測器當柱溫箱使用,小哥哥小姐姐們直接把色譜柱放在了檢測器里,檢測器內(nèi)壁上已經(jīng)是斑駁的銹跡和結晶的鹽顆粒,這波操作潛在破壞力比較強大,搞不好哪天來個“水漫金山”就需要換板子了。


正確選擇液相色譜儀

  一、技術指標優(yōu)異

  首先是如何看指標。液相色譜儀的指標很多,有泵的、檢測器的、色譜柱等等。我們認為要看主要技術指標,根據(jù)國家標準,儀器的主要指標有噪音,漂移,最小檢測濃度,定性定量重復性等。這些指標都要放在系統(tǒng),回路里去看,去比較。就是需要把各單元裝置都要聯(lián)接好,如接好色譜柱,進樣閥,并且要通上流動相。因為您在分析中也都是聯(lián)接好以后才可以進行分析的,而不是單單用個檢測器或是泵的。

  然后在這個基礎上,我們再去比較這些主要指標。

  1、噪音

  是指由儀器的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其他非溶質(zhì)作用產(chǎn)生的高頻噪聲和基線的無規(guī)則波動。噪音的大小直接關系到儀器的檢測靈敏度,噪音越大,檢測的靈敏度就越低。對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好,否則噪音過大將會導致基線不穩(wěn),甚至影響分析結果。

  2、最小檢測濃度(最小檢測限)

  是反映儀器靈敏度的重要參數(shù)。CL=2×Nd×C/H(CL:最小檢測濃度Nd:噪音C:樣品濃度最小檢測濃度H:樣品峰高)由上式可見,最小檢測濃度是和噪音成正比的,噪音越大,最小檢測濃度就越大,靈敏度就越低。某些廠家回避了這個指標,說明他們不愿在最小檢測濃度的基礎上去比較噪音。

  3、漂移

  是指儀器穩(wěn)定后一段時間內(nèi)基線漂離原點的距離,通常用來衡量儀器穩(wěn)定快慢。高品質(zhì)的儀器能在較短的時間內(nèi)達到穩(wěn)定,從而在一定程度上提高了分析效率。

  4、定性定量重復性

  主要是考核儀器穩(wěn)定性的指標,這對于分析樣品來說是非常重要的。好的儀器其穩(wěn)定性應該是十分優(yōu)秀的,這就要求多次進樣保留時間及含量的一致性,這樣做出來的結果才能使人信服。

  二、系統(tǒng)的整體開發(fā)

  這里指的是儀器的整體開發(fā),是一個完整的系統(tǒng)。目前市場上有這個現(xiàn)象,說我的泵是進口的,或者是檢測器怎么好,用了什么很多的進口件組裝等等。其實這是個誤區(qū)。液相色譜是個復雜的系統(tǒng),不是整體開發(fā)的,各項指標之間、軟件和硬件、硬件和硬件等都不匹配,整體水平不會高到哪里去,而且在售后服務方面對用戶也是不負責任的。

  整體開發(fā)的主要優(yōu)點有:各項技術指標統(tǒng)一、儀器各單元的通信協(xié)調(diào)、能夠建立一個整體的數(shù)字化評價系統(tǒng)、體現(xiàn)了企業(yè)的科技及開發(fā)實力。

  國外知名的儀器生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品也是整體開發(fā)的,所以能夠保證儀器的整體水平。

  三、操作方便

  操作方便性無論是對新手還是成熟的用戶都是很重要的。操作越簡單,有利于提高分析效率,也為以后分析方法的拓展提供有力的幫助。

  四、穩(wěn)定可靠,故障率低。

標簽: 液相色譜儀
液相色譜儀標簽: 正確選擇液相色譜儀_液相色譜儀組合標題:
  色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術,結合色譜及質(zhì)譜的技術,是目前分離和鑒定的重要的分析方法之一。其中液相色譜-質(zhì)譜儀應用更為廣泛,液相色譜除了能分析一般的化合物,還能分析氣相色譜不能分析的強極性、熱不穩(wěn)定性、難揮發(fā)的化合物。液相色譜質(zhì)譜儀由色譜儀、接口、質(zhì)譜儀、電子系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)和計算機系統(tǒng)六大部分組成,是一種的檢測儀器,儀器的良好工作狀態(tài)是檢測準確度的一個重要影響因子。為了保證儀器有一個良好的狀態(tài),保證檢測結果的可靠性,需要正確合理的使用和維護儀器。下面以液相色譜儀為例,從儀器進樣系統(tǒng)、色譜柱系統(tǒng)等各個系統(tǒng)的日常維護保養(yǎng)進行詳細闡述,并對使用過程中容易遇到的問題進行分析,提出解決方法。
 
安捷倫液相色譜儀1260
 
  液相部分的維護
 
  開機注意事項
 
  要求使用220?V單相交流電。如發(fā)生斷電,不管任何原因造成的,首先關閉儀器面板左下角的開關,等待供電恢復10分鐘以上再開啟電源,否則有可能燒毀電路板。儀器運行時需提供純度>99%的氮氣作為噴霧與干燥氣,輸出壓力為0.6~0.7?MPa。實驗開始前先檢查液氮罐液體存量是否充足。儀器開機時,確認電源已經(jīng)連接而且氣振閥處于關閉,打開儀器總電源,隨后將前面板左下方的電源按鍵按下,真空泵即開始工作。大約2~3分鐘后,儀器內(nèi)置的系統(tǒng)啟動完畢,可以開啟Mass hunter軟件與儀器通訊。等待四極桿溫度達到100℃,高真空達到4×10-5??Torr之后,即可進行調(diào)諧或開始實驗。在儀器開始抽真空時,請不要打開前級泵上的氣振閥,否則可能因為回油污染真空腔體內(nèi)部。
 
  流動相的要求
 
  每次開機前,保證超純水和流動相的新鮮,泵的各個管路不應余留上次殘留的溶劑。流動相需符合HPLC與LC-MS要求等級,流動相中盡量加易揮發(fā)的鹽,盡量不使用表面活性劑之類,否則容易導致離子抑制,表面活性劑產(chǎn)生的加合物和離子簇會干擾質(zhì)譜數(shù)據(jù)。如果遇到離子抑制,可以把樣品峰往后推或者改變提取方法,或者考慮用APCI源。盡量不使用無揮發(fā)性的緩沖劑,例如,磷酸緩沖劑等,磷酸鹽及其他不揮發(fā)緩沖鹽在離子源會沉淀并堵塞毛細管等。另外液質(zhì)不能承受過大流速。溶劑瓶避免陽光直射。
 
  樣品的要求
 
  保證樣品的清潔,進樣前盡量使用0.22?µm的濾膜濾過,避免樣品太臟而堵塞色譜柱或離子源的毛細管;樣品溶劑必須是色譜純,應該和流動相比例一致;進樣濃度不宜太高,因為太高濃度的樣品容易污染靈敏度高的儀器,進而影響檢驗結果。由于液質(zhì)的流速較小(ESI一般為0.2?mL/min),所以配置樣品的溶劑強度不能太大,盡量小于起始比例,否則,會出現(xiàn)保留時間偏移、峰形扭曲等問題。
 
  進樣系統(tǒng)的維護
 
  對于液相色譜來說,無論是手動進樣還是自動進樣,都是使用六通閥進樣的。進樣裝置要求:密封性好,死體積小,重復性好,保證中心進樣,進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小樣。六通閥使用及維護注意事項:①樣品溶液進樣前必須用0.45?µm濾膜過濾,以減少微粒對進樣閥的磨損。②轉(zhuǎn)動閥芯時不能太慢,更不能停留在中間位置,否則流動相受阻,使泵內(nèi)壓力劇增,甚至超過泵的限值壓力;再轉(zhuǎn)到進樣位時,過高的壓力將使柱頭損壞。③為防止緩沖鹽和樣品殘留在進樣閥中,每次分析結束后應沖洗進樣閥。通??捎盟疀_洗,或先用能溶解樣品的溶劑沖洗,再用水沖洗。注意:溶劑入口過濾芯為消耗品,尤其不可以使用超聲清洗,可以使用稀硝酸浸泡,然后用水沖洗至中性,以重復使用。
 
  色譜柱系統(tǒng)的維護
 
  在色譜操作過程中,需要注意下列問題:①色譜柱的選擇會直接影響混合物中組分的分離,所以一定要選用合適的色譜柱,在使用新柱前要在自己的液相色譜儀上進行性能測試,即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效,并且在以后的使用中,應時常對色譜柱進行測試。②柱子在使用過程中,不能碰撞、彎曲或強烈震動;避免壓力和溫度的急劇變化,機械震動和溫度的突然變化都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應該緩慢進行。③當柱子和色譜儀聯(lián)結時,閥件或管路一定要清洗干凈,樣品前處理對于柱子使用壽命影響甚大,進樣樣品要提純過濾并且嚴格控制進樣量,可以使用保護柱。④注意色譜柱的pH值使用范圍,不能高溫下過長時間使用硅膠鍵和相;每天分析工作結束后,都要用適當?shù)娜軇﹣砬逑粗印H舴治鲋L期不使用,應用適當有機溶劑保存并封閉。


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