乙蒜素為我國(guó)S創(chuàng)綠色農(nóng)藥，是一種植物仿生農(nóng)藥，可抑制糧油、棉花、蔬菜、花卉、藥材、茶葉等作物以及蠶業(yè)、漁業(yè)的數(shù)十種病菌。殺菌效果優(yōu)越、活性穩(wěn)定、與植物親和力強(qiáng)，容易被作物吸收，快速殺滅病菌且易降解，不易產(chǎn)生抗性。
乙蒜素目前已廣泛應(yīng)用于防治水稻爛秧病、惡苗病、稻瘟病、白葉枯病；麥類黑穗病、條紋??；棉花枯萎病、黃萎??；果樹(shù)輪紋病、炭疽??；作物苗期立枯病、猝倒病、爛根病等。乙蒜素還能刺激作物生長(zhǎng)、壯根壯苗。隨著科技的發(fā)展和人們對(duì)乙蒜素認(rèn)識(shí)的不斷提高，乙蒜素的使用范圍將會(huì)不斷擴(kuò)大，用量日增，市場(chǎng)前景廣闊。
本文采用反相液相色譜法，使用C18反相柱和紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器，對(duì)乙蒜素原藥中有效成分進(jìn)行定量分析，得到良好結(jié)果。該方法具有操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，能為乙蒜素的生產(chǎn)質(zhì)量控制和分析方法提供參考。
儀器準(zhǔn)備
儀器簡(jiǎn)介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測(cè)器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時(shí)控制數(shù)臺(tái)P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測(cè)器及恒溫柱箱等，實(shí)行多元高壓洗脫、波長(zhǎng)掃描等功能。
應(yīng)用領(lǐng)域
化合物檢測(cè)、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測(cè)、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
色譜條件：
色譜柱 | Promosil-C18（150mm×4.6mm，5μm) |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 210nm |
流動(dòng)相 | 乙腈-水（30:70,V/V） |
流速 | 1.0mL/min |
進(jìn)樣量 | 5μL |
測(cè)定結(jié)果：
色譜柱是高效液相色譜儀最主要的部件，被測(cè)物質(zhì)能否被很好的分離和測(cè)定，色譜柱的性能起著決定性的作用。因此，在日常工作中，應(yīng)特別注意色譜柱的正確使用和維修保養(yǎng)，以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。
1、使用預(yù)柱和保護(hù)柱
預(yù)柱(pre-column)安裝于泵和進(jìn)樣器之間，它給色譜柱中的流動(dòng)相提供了完全的平衡，并防止了對(duì)柱填料有破壞作用的組分或污染物進(jìn)入色譜柱。保護(hù)柱(guardcolumn)可以阻擋能夠牢固地吸附于色譜柱上的組分進(jìn)入色譜柱，保護(hù)柱應(yīng)與色譜柱的填料相同。預(yù)柱和保護(hù)柱可以經(jīng)常更換，而不需要經(jīng)常更換色譜柱，這就延長(zhǎng)了色譜柱的使用壽命。
2、防止氣體進(jìn)入
有些色譜柱(如凝膠柱)是不允許氣泡進(jìn)入的，否則將會(huì)使柱效降低甚至形成微小的難以驅(qū)除的氣室。因此，為了防止氣泡進(jìn)入色譜柱，一定要使用經(jīng)過(guò)脫氣的流動(dòng)相，并且要嚴(yán)格按照下列步驟來(lái)安裝色譜柱。a、拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲，觀察是否有溶劑滲出；b、如有溶劑滲出，即可將色譜柱接到管路上，以避免氣泡的進(jìn)入；c、如無(wú)溶劑滲出時(shí)，表明色譜柱的此端已經(jīng)進(jìn)去空氣了，此時(shí)，可將色譜柱的出口端接到進(jìn)樣閥上，以流動(dòng)相來(lái)反方向沖洗色譜柱，以便將柱內(nèi)的空氣排除?？梢砸?、2ml/min的小流量來(lái)沖色譜柱，如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會(huì)導(dǎo)致柱性能的降低；d、如果流出的溶劑里不含有氣泡，說(shuō)明柱內(nèi)的氣體已經(jīng)被排出了，再將色譜柱以正確的方向接好，這樣氣泡就進(jìn)不到色譜柱里面了。
3、清洗
為了不使被測(cè)物質(zhì)和雜質(zhì)停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后，都應(yīng)及時(shí)地清洗色譜柱。首先要用對(duì)被測(cè)樣品洗脫能力強(qiáng)的溶劑來(lái)洗脫色譜柱，以分析工作中常用的反相色譜分析法為例，因其先流出的物質(zhì)是極性大的物質(zhì)，此時(shí)應(yīng)用100%的甲醇或使用異丙純、四氫呋喃等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內(nèi)的極性小的物質(zhì)洗脫下來(lái)，洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可。如果流動(dòng)相是緩沖溶液，則應(yīng)先用蒸餾水來(lái)沖洗色譜柱，以沖掉柱內(nèi)的鹽，然后再用合適的溶劑來(lái)沖洗。
凝膠濾過(guò)色譜法(GelFiltrationChromatography)中所使用的凝膠柱常用緩沖溶液做流動(dòng)相，用完之后當(dāng)然要用蒸餾水來(lái)沖洗。如果是連續(xù)操作，可以將緩沖溶液置于柱內(nèi)過(guò)夜，但可以是維持小流速(＜0、5ml/min)以防止緩沖鹽的析出，如果流動(dòng)相中含有鹵化物，即使是停一夜，也必須要用蒸餾水將色譜柱沖洗干凈，以防止它們對(duì)柱體的腐蝕。
4、存放
如果色譜柱暫時(shí)不用，存放時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：
a、幾天之內(nèi)的短期放置，應(yīng)先用溶劑沖洗好色譜柱(如凝膠柱則用蒸餾水來(lái)沖洗)，再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可。
b、如果色譜柱長(zhǎng)期不用，僅用上述方法來(lái)處理就不行了，這時(shí)應(yīng)使用色譜柱使用說(shuō)明書(shū)中所指明的溶劑來(lái)充滿色譜柱，反相柱一般使用甲醇，正相柱則可用正已烷或庚烷，而凝膠柱則不能用水了，因柱內(nèi)如果有微生物的生長(zhǎng)則會(huì)使柱效降低，此時(shí)應(yīng)用0、05%的NaNs水溶液(防腐劑)來(lái)沖洗色譜柱，再將色譜柱封嚴(yán)。色譜柱長(zhǎng)期放置時(shí)，一定要將色譜柱的兩端封嚴(yán)，以防止由于溶劑揮發(fā)而造成的柱填料干縮現(xiàn)象，因這可導(dǎo)致柱效的嚴(yán)重降低。
c、色譜柱應(yīng)貯存在室溫下，如果放置于0℃以下的環(huán)境里，柱內(nèi)就會(huì)結(jié)冰，這也將導(dǎo)致柱效的降低。
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