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紫外可見分光光度計雜散光測試步驟 光度計如何操作

時間:2020-07-10    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

  據(jù)了解,有的紫外可見分光光度計只測試220nm處的雜散光,不測試340nm處的雜散光,這樣是不正確的,需測試220nm處雜散光是因為:①根據(jù)量子光學(xué)理論,波長是能量的倒數(shù),波長短能量大,容易產(chǎn)生雜散光,而220nm處屬于短波部分;②根據(jù)儀器學(xué)理論中的電光源理論,氘燈在220nm處能量很小,即信號很小,容易顯現(xiàn)雜散光;③根據(jù)儀器學(xué)理論中的光電發(fā)射理論,光電倍增管在220nm處的光譜響應(yīng)(靈敏度)低,容易顯現(xiàn)雜散光。而測試340nm處雜散光的原因是完全不同的,因為340nm處一般是氘燈換鎢燈和儀器調(diào)換濾光片的地方,此時容易產(chǎn)生雜散光。所以,對于紫外可見分光光度計來講,應(yīng)該測試220nm和340nm兩處的雜散光。
 

  紫外可見分光光度計雜散光測試步驟:
 

  1、首先將參比液注入配對石英石吸收池,分別放置在參比池座和試樣池座內(nèi)。再測定波段掃描基線并使之平滑。
 

  2、將減光片插入試樣光路的濾光片槽內(nèi),其讀數(shù)即為減光片的衰減值K,然后將減光片插入?yún)⒈裙饴返臑V光片座內(nèi),
 

  3、將石英吸收池中的蒸餾水依次換成上述截止濾光液,插入試樣試樣池座中,在相應(yīng)的波段內(nèi)掃描、打??;在記錄紙的作標(biāo)上量取測定波長處的透光度,乘以衰減值K,即得各測定波長處的雜散光值。
 

紫外可見分光光度計使用說明

 

    紫外可見分光光度計來自于美國,產(chǎn)品包含光源,單色器,吸收池,檢測器和顯 示器等,它是一款對物質(zhì)進行定性,定量以及結(jié)構(gòu)分析的儀器。這款儀器和人們常 用的可見光光度計有有很大的區(qū)別,除了波長范圍,使用光源都不一樣等,價格也 是后者要要貴一些;平時的使用和注意事項不一樣的,今天就先來學(xué)習(xí)一下紫外可見分光光度計使用方法:    1.試驗中所用的量瓶、移液管均應(yīng)經(jīng)檢定校正、洗凈后使用。    2.使用的石英吸收池必須潔凈。用于盛裝樣品、參比及空內(nèi)溶液的吸收池,當(dāng)裝 入同一溶劑時,在規(guī)定波長測定吸收池的透光率,如透光率相差在0.3%以下者可配 對使用,否則必須加以校正。    3.取吸收池時,手指拿毛玻璃面的兩側(cè)。裝盛樣品溶液以池休積的4/5為度,使用 揮發(fā)性溶液吋應(yīng)加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應(yīng)無殘留溶劑。 為防止溶劑揮發(fā)后溶質(zhì)殘留在池子的透光面,可先用蘸有空白溶劑的擦鏡紙擦拭, 然后再用干擦鏡紙拭凈。吸收池放入樣品室時應(yīng)注意每次放入方向相同。使用后用 洗液及水沖洗干凈,晾干防塵保存,吸收池發(fā)現(xiàn)污染不易洗凈時可用硫酸發(fā)煙硝酸(3 :1V/V)混合液稍加浸泡后,洗凈備用。如用重鉻酸鉀清潔液清洗時,吸收池不貧在 清潔液中長時間浸泡,否則清潔液中的重鉻酸鉀結(jié)晶會損壞吸收池的光學(xué)表面,并 應(yīng)充分甩水沖洗,以防重鉻酸鉀吸附于吸收池表面。    4.測定前應(yīng)先檢查所用的溶劑在測定供試品所用的波長附近是否符合要求,可用 lcm石英吸收池盛溶劑以空氣為空白(即參比光路中不放置任何物質(zhì))測定其吸收度 ,應(yīng)符合規(guī)定。    5.稱量應(yīng)按藥典規(guī)定要求。配制測定溶液時稀釋轉(zhuǎn)移次數(shù)應(yīng)盡可能少,轉(zhuǎn)移稀釋 時所取容積一般應(yīng)不少于5cm。含量測定供試品應(yīng)稱取2份,如為對照品比較法,對 照品一般也應(yīng)稱取2份。吸收系數(shù)檢查也應(yīng)稱取供試品2份,平行操作,每份結(jié)果對 平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。作鑒別或檢查可取樣品1份。    6.供試品測定溶液的濃度,除各該品種項下已有注明者外,供試品溶液的吸收度 以在0.3~0.7之間為宜,吸收度讀數(shù)在此范圍誤差較小,并應(yīng)結(jié)合所用儀器吸收度線 性范圍,配制合適的讀數(shù)濃度。    7.選用儀器的狹縫譜帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值 會偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減小狹縫寬度吋供試品的吸收度不揮增加為準(zhǔn),對于 紫外測定的部分品種,可以使用2nm縫寬,但對某些品種如青霉素鉀及鈉的吸收度 檢查則需用lnm縫寬或更窄,否則其264nm的吸收度會偏低。    8.測定時除另有規(guī)定者外,應(yīng)在規(guī)定的吸收峰±2nm處,再測幾點的吸收度,以核 對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度最大的波長作為測定波長,除另有規(guī) 定外吸收度最大波長應(yīng)在該品種項下規(guī)定的波長±lnm以內(nèi),否則應(yīng)考慮試樣的同一 性、純度以及儀器波長的準(zhǔn)確度    9.除另有規(guī)定外,比色法所用的空內(nèi)系指用同休積的溶劑代替對照品或供試品溶 液,然后依次加入等量的相應(yīng)試劑,并用同樣方法處理。    10.當(dāng)吸收度和濃度關(guān)系不呈線性關(guān)系時,應(yīng)取數(shù)份梯度量的對照濃度,用溶劑補 充至同一休積,顯色后測定各份溶液的吸收度,然后以吸收度與相應(yīng)的濃度繪制標(biāo) 準(zhǔn)曲線,再根據(jù)供試品的吸收度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出其含量。

標(biāo)簽: 紫外可見分光光度計
紫外可見分光光度計 紫外可見分光光度計使用說明_紫外可見分光光度計
  紫外可見分光光度計是由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。光源的功能是提供足夠強度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜。紫外光區(qū)通常用氫燈或氘燈。見光區(qū)通常用鎢燈或鹵鎢燈。單色器的功能是將光源發(fā)出的復(fù)合光分解并從中分出所需波長的單色光。
 
  色散元件有棱鏡和光柵兩種??梢姽鈪^(qū)的測量用玻璃吸收池,紫外光區(qū)的測量須用石英吸收池。檢測器的功能是通過光電轉(zhuǎn)換元件檢測透過光的強度,將光信號轉(zhuǎn)變成電信號。常用的光電轉(zhuǎn)換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測器。分光光度計的分類方法有多種:按光路系統(tǒng)可分為單光束和雙光束分光光度計;按測量方式可分為單波長和雙波長分光光度計;按繪制光譜圖的檢測方式分為分光掃描檢測與二極管陣列全譜檢測。
 
  儀器電源接通后,光源不亮。
 
  原因:
 
 ?、俟庠礋襞菀褤p壞。
 
 ?、诒kU管燒壞。
 
  處理方法:
 
 ?、俑鼡Q氘燈或鎢燈。
 
 ?、诟鼡Q保險管。
 
  紫外可見分光光度計噪音較大。
 
  原因:
 
  光源燈泡使用時間超過壽命期。
 
  處理方法:
 
  更換光源燈泡。
 
  自檢時提示波長自檢出錯。
 
  原因:
 
  自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。
 
  處理方法:
 
  關(guān)上儀器樣品室蓋子,重新自檢。
 
  儀器自檢時提示通訊錯誤。
 
  原因:
 
  儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒有連接好。
 
  處理方法:
 
  連接好數(shù)據(jù)線,重新打開儀器和軟件,重新自檢。
 
  儀器零點飄忽不定,主要反映在簡易儀器上。
 
  原因:
 
  在簡易儀器中,零點往往是通過電位器來調(diào)整,這種電位器一般是炭膜電阻制作的,使用久了往往造成接觸不良。
 
  處理方法:
 
  更換電位器。
 
  在使用過程中,出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零,同時伴有圖線記錄基線位置偏高。
 
  原因:
 
  ①光電倍增等老化,性能降低。
 
 ?、谛盘柼幚戆蹇赡馨l(fā)生故障。
 
 ?、矍爸梅糯蟀娉霈F(xiàn)故障,引起反饋量增大
 
  處理方法:
 
 ?、匍_機通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對照,找出異同點,并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規(guī)格的新光電倍增管替換機上的光電管,再開機實驗,結(jié)果記錄出來的圖線并沒有什么變化,由此證明光電倍增管沒有老化變質(zhì)。
 
  ②進一步檢查信號處理板,未發(fā)現(xiàn)信號處理板各元器件損壞,對影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測,結(jié)果測得數(shù)據(jù)正常,這說明信號處理板沒有故障。
 
  測試過程中提示能量太低。
 
  原因:
 
 ?、俟庠礋襞菔褂脮r間超過壽命期。
 
 ?、跇映刂杏胁煌腹獾臇|西擋住了光。
 
  處理方法:
 
 ?、俑鼡Q光源燈。
 
 ?、谀米邠豕獾奈锲贰?br /> 
  吸光值結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值(常見)。
 
  原因:
 
  沒做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液。
 
  處理方法:
 
  做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液。
 
  當(dāng)儀器波長固定在某個波長下時,吸光值信號上下擺動,特別是測量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡易儀器。
 
  原因:
 
  開關(guān)觸點因長期氧化所致造成接觸不良。
 
  處理方法:
 
  用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可。
 
  樣品信號重現(xiàn)性不良
 
  原因:
 
  排除紫外可見分光光度計本身的原因外,大的可能是樣品溶液不均勻所致,在簡易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時重復(fù)推拉不在同一個位置上。
 
  處理方法:
 
 ?、俨扇≌_的試樣配置手段。
 
 ?、谛蘩硗评綐悠芳艿亩ㄎ慌鲋?。
 


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